【求助】液质方法开发时，LC梯度的优化

最新回复

• nn255 (2016-2-23 16:44:20)

  您这是HILIC柱子用到的程序吗？？还是您A和B上面标示弄反了啊？1min时间增加这么快啊？做残留的话，估计基质效应很强啊

• biabiade (2016-2-23 16:44:38)

  我觉得1+2都可以啊，CAN是什么？

• 冰岛老叟 (2016-2-23 16:45:15)

  对了，是弄反了！

• 冰岛老叟 (2016-2-23 16:45:34)

  在一些常规化合物中，可能并不需要去考虑这些。
  在方法开发时，什么是你优先考虑？在遇到一些拖尾严重的化合物时，又没有合适的色谱柱时，你会怎么优化LC呢？
  希望大家可以分享一下经验，共同讨论讨论。

• 小荷尖尖 (2016-2-23 16:45:59)

  如果方法开发时遇见峰拖尾，通常简单判断一下原因，是否是色谱柱走样时间长了，脏了；还是开发质谱方法后，化合物在管路中残留（有的化合物喜欢残留）；排除后，正常出峰拖尾严重，可能是流动相PH值不匹配，先调梯度看能不能解决，再用常见的FA,醋酸铵，氨水之类的摸一摸化合物的酸碱性，不行，还可以试挥发性离子对试剂。
  有时换根类型匹配的柱子就可以解决，还是换柱子方便啊，，，，

• taoshengyijiu (2016-2-23 16:46:17)

  这个梯度很有意思,起始的流动相配比是多少,为什么要加一个0.01min90:10的流动相配比?在遇到严重拖尾时可以考虑用缓冲溶液来调整峰型,乙酸,甲酸,在不连质谱的情况下可以加磷酸效果可能会更好。

• dongdongqiang (2016-2-23 16:46:38)

  回7楼：他这是岛津的液相，起始都设置为0.01.相当于0
  回楼主：讨论：1.认为出峰时间适合优化在，0.6-1.6min，梯度洗脱增强，峰型好；      
    2.认为出峰时间适合在1.6-2.0min，高有机相，雾化好，响应高，精密度好。
  个人认为0.6-1.6min并不合适，应该设为1.2-1.6min，0.6min时有机相比例10%雾化肯定不好，没人会让峰那时候出来，1.2min时有机相比例接近60%雾化一般不成问题。1.6-2min时候峰形一般也不会差。
  所以总结应该是1.2-2min都可以，当然可根据具体情况再适当调节梯度，只可意会不可言传了就。

• DNA (2016-2-23 16:46:54)

  岛津的液相时间0.01是相当于零，我觉得目标物的保留时间要是出在1.6-2.00之间是最稳定的！当然你一个方法里面要是走很多化合物的话，有的保留时间可能会出现在0.6-1.6之间！我觉得0.6-1.6之间的时间你可以在缩短一些都可以！保证更多的目标物能在雾化比较好的高比列有机相的时间出峰！感觉你的这个梯度可以再适当的调节优化！

• DNA (2016-2-23 16:47:51)

  QUOTE:

  原帖由 biabiade 于 2016-2-23 16:44 发表
  我觉得1+2都可以啊，CAN是什么？

  ACN是乙腈！

• 冰岛老叟 (2016-2-23 16:48:16)

  QUOTE:

  原帖由 dongdongqiang 于 2016-2-23 16:46 发表
  回7楼：他这是岛津的液相，起始都设置为0.01.相当于0
  回楼主：讨论：1.认为出峰时间适合优化在，0.6-1.6min，梯度洗脱增强，峰型好；      
    2.认为出峰时间适合在1.6-2.0min，高有机相，雾化好，响应高，精密度好。
  个人认为0.6-1.6min并 ...

  说的比较细。漂亮的数据和图谱，是雾化和稳定性的综合考虑的情况下得到的。
  对于质谱这样的高灵敏度的仪器，也给追求更高质量的数据要求带来了可能。

• zhezhe (2016-2-23 16:49:01)

  0.6-1.6分钟叫梯度洗脱的分离段，1.6-2.0分钟叫色谱柱清洗段。雾化效果可以通过脱溶剂气温度和流量来控制

• 红袖添香 (2016-2-23 16:49:18)

  峰形好才是王道