【求助】测质谱，目的是测定分子量

最新回复

• dadaai (2016-3-03 11:34:15)

  你先对照你的蛋白分子量看看啊，我看不像是酶切之后的，倒像是直接给你样品分析的，不知道你的样品纯度如何？

• 今生如此 (2016-3-03 11:34:35)

  样品WM大概在20kda左右，纯度可以达到90%的，我是想把这两个图放论文中，可是也不知道怎么讨论，只能说由于仪器误差导致的测试误差

• yayayu (2016-3-03 11:34:54)

  呵呵，有点意思啊。我还不清楚这种仪器电离化的方法，但是你说了分子量是20kd，现在结果是20445，说明就是单电荷的。    我的理解标准品是用来给你分析误差的，表明是已知分子量，现在测试，你就能算出误差率。 然后将该误差率应用到你的样品上。你还的找他们要标准品是什么，分子量是多少。 然后查询该仪器电离化的方法，确定如果是单电荷，那就是数字是多少分子量就是多少！

• hcy517 (2016-3-03 11:35:16)

  可以做些误差分析的。还需要用些标物标定。

• 蓝色雨梦 (2016-3-03 11:35:38)

  说实话MALDI的我没用过，只知道些大致原理。产生的离子多是单电荷离子，这一点与ESI十分不同，所以上面显示的基本是你的分子量再减去1，当然这要把参考离子的误差算在内。

• wwwh (2016-3-03 11:35:58)

  这位朋友，MALDI产生的离子多是单电荷离子，与ESI不同。我理解的MALDI好像没有离子源之分，只有激光源波长种类的差别。不知对不对啊，互相交流啊。

• qinqinai (2016-3-03 11:36:21)

  有可能是误差，也有可能是同位素峰，这个应该不是切断以后的，酶切也有个过程，一般需要送样人自己处理好的，处理好以后得到的应该是肽的质谱信息也不会是半胱氨酸的信息。

• danzi (2016-3-03 11:36:46)

  感觉是找了个20KD左右的标准蛋白做了校正，然后再做你的蛋白

• hcy517 (2016-3-03 11:37:09)

  如果是激光轰击失去一个电子，那分子量应该就不用减1了吧。  不了解该方法，我只是了解一些ESI的，还需要计算电荷数，然后才能算出来分子量。

• QQ爱 (2016-3-03 11:37:29)

  您好，麻烦问一下，我的物质理论分子量是3800左右，然后质谱测试值比我的体积要多60多，这个是误差原因，还是是我的物质里面还有其他含量呢？谢谢

• 女儿情 (2016-3-03 11:37:57)

  我着实不是搞质谱的，不过是准备过一次文献课，上过两次培训而已，连略知皮毛都谈不上。 对于您的问题，不清楚原因，抱歉

• danzi (2016-3-03 11:38:18)

  z，这两张MALDI的图其实不太好，你有没注意到，你的第一张谱图处的9千多还出了一个峰，感觉像是做MALDI时激光能量太大，双电荷峰都出来了。
  另外，这两张谱图应该是分别累加多张谱图累加出来的吧？一个像大包的峰里有个尖峰突出来，比较奇怪，如果是多张谱图累加出来的，也就不奇怪了，MALDI存在结晶不均匀的问题，在不同的点打出来的图可能会略有差别。
  其实你更应该关注，你的峰宽都有1500Da了，分子量标出来差个几百Da，也不是不可能的事。
  你可以把两张图stack比对看看。

• n111 (2016-3-03 11:38:38)

  您好，请问做质谱需要的样品纯度一般是什么样的情况呢？

• mimima (2016-3-03 11:39:02)

  要看你用什么质谱了哦，理论上是不考虑样品纯度的，还有浓度不要太低啊。

• rrra6 (2016-3-03 11:39:23)

  非常感谢您的回复O(∩_∩)O~
  不用考虑杂质蛋白对目标蛋白的干扰吗？浓度应该不成问题，样品是用干粉自己配制的，浓度应该好控制的，您说的不要太低有没有具体的量的经验值呢？

• wawa11 (2016-3-03 11:39:48)

  因为质谱本身就是要有检测多种物质的能力的，所以不能担心杂蛋白的影响、
  我现在用的是单TOF，一般要求不低于0.5 mg/ml.

• huali (2016-3-03 11:40:11)

  你这个质谱检测应该是普通的质谱，通常普通的质谱检测误差范围为1%，高精度质谱检测分子量可以精确到1Da，先根据你的蛋白分子量序列算一下你的理论分子量后，看看是否在误差范围之内吧！质谱检测要求样品的纯度应能达到90%以上！再就是对图谱不懂的可以跟检测单位的检测人沟通一下，检测的方法及使用的标准品一般都是可以提供的。希望能帮到你！

• xgy412 (2016-3-03 11:40:37)

  一般要求样品的纯度大于90%