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标题:【求助】测质谱，目的是测定分子量

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发表于 2016-3-3 11:33 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】测质谱，目的是测定分子量

送蛋白样品出去测质谱，目的是测定分子量，用的是MALDI-TOP质谱仪，标准品与测试样图谱分别如下，回来后就给两个图谱，也木有啥分析，不知道是到底是分子量分析还是酶切后半胱氨酸分析，大家帮忙分析一下这谱图。


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发表于 2016-3-3 11:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

你先对照你的蛋白分子量看看啊，我看不像是酶切之后的，倒像是直接给你样品分析的，不知道你的样品纯度如何？
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 小中大

【回复】

样品WM大概在20kda左右，纯度可以达到90%的，我是想把这两个图放论文中，可是也不知道怎么讨论，只能说由于仪器误差导致的测试误差
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yayayu[使用道具]
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发表于 2016-3-3 11:34 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

呵呵，有点意思啊。我还不清楚这种仪器电离化的方法，但是你说了分子量是20kd，现在结果是20445，说明就是单电荷的。    我的理解标准品是用来给你分析误差的，表明是已知分子量，现在测试，你就能算出误差率。 然后将该误差率应用到你的样品上。你还的找他们要标准品是什么，分子量是多少。 然后查询该仪器电离化的方法，确定如果是单电荷，那就是数字是多少分子量就是多少！
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发表于 2016-3-3 11:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

可以做些误差分析的。还需要用些标物标定。
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 小中大

【回复】

说实话MALDI的我没用过，只知道些大致原理。产生的离子多是单电荷离子，这一点与ESI十分不同，所以上面显示的基本是你的分子量再减去1，当然这要把参考离子的误差算在内。
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发表于 2016-3-3 11:35 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

这位朋友，MALDI产生的离子多是单电荷离子，与ESI不同。我理解的MALDI好像没有离子源之分，只有激光源波长种类的差别。不知对不对啊，互相交流啊。
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qinqinai[使用道具]
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发表于 2016-3-3 11:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【求助】

有可能是误差，也有可能是同位素峰，这个应该不是切断以后的，酶切也有个过程，一般需要送样人自己处理好的，处理好以后得到的应该是肽的质谱信息也不会是半胱氨酸的信息。
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发表于 2016-3-3 11:36 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

感觉是找了个20KD左右的标准蛋白做了校正，然后再做你的蛋白
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hcy517[使用道具]
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发表于 2016-3-3 11:37 资料 个人空间 短消息  加为好友 

 小中大

【回复】

如果是激光轰击失去一个电子，那分子量应该就不用减1了吧。  不了解该方法，我只是了解一些ESI的，还需要计算电荷数，然后才能算出来分子量。
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