[求助]RNA抽提其它问题迫切求教

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• 雪花子 (2011-10-22 17:02:20)

  1，TBE缓冲液不用特意消毒，先按常规的配法配成10X保存，到用时，用你的DEPC水稀释后使用，RNA的检测最好在20分钟跑完，而且电泳液要现配！
  2，加完氯仿后要用力震荡，静止几分钟后能见分层，但不明显，整个离心后能见明显分层！
  3，要用冷冻离心机，至少要达8度！实在没有，本人认为可以用一用，但整个实验要在冰上进行，最大限度的降低RNA降解的可能性！
  4，是质量比
  5，最好不要放在常温下
  6，用手就可以，但每一次的方法都不一样！
  7，放置几分钟就可以！要打开盖子，一定要放在不通分的地方！
  如果你那有无菌柜，最好在无菌柜进行，在要关了通风柜！

• 阿福 (2011-10-22 17:02:36)

  1 75%的酒精溶液洗涤后装RNA的EP管放在超净台中干燥就可以了；
  2 每次混匀用手来回颠倒EP管即可;
  3 没有冷冻离心机也可以，加氯仿后要冰冻10min再离心，加冰冻的异丙醇后室温静置10min，然后冰冻10min再离心
  4 入氯仿混匀静置后好像没见明显分层正常，整个离心后取上清

• INK (2011-10-22 17:03:41)

  请问“加氯仿后要冰冻10min再离心，加冰冻的异丙醇后室温静置10min，然后冰冻10min再离心”这其中的“冰冻”是要多少度呢？

• ero11 (2011-10-22 17:04:27)

  7、如何干燥RNA? 75%的酒精溶液洗涤后装RNA的EP管放在什么地方干燥才不会被污染？要打开盖子吗？
  如果抽提RNA的量较大（可以看到明显的白色pellet），可以再用100%的酒精洗一次，然后打开盖子放在通风橱或洁净操作台上，几分钟就可以了， 过于干燥不利于下一步操作。
  不用过于紧张，我们做RT-PCR除了戴口罩、手套、使用DEPC水之外并没有特别注意，提的RNA就开盖放在操作台上，也还好。  

• 锤子 (2011-10-22 17:06:17)

  我提取RNA没有用冷冻离心机,就把普通离心机的转子提前放到冰箱里冻着,用的时候装上,一样好使.不妨试试.