【求助】固相萃取柱应当用的萃取过程是什么

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• yayayu (2016-4-08 12:02:01)

  我用这种柱子做过试验，具体选用何种过程视具体药物而定，药物不同，萃取过程不同。但一般要用1ml MeOH，和1ml水先活化柱子，最后用1ml MeOH洗脱。建议在查查国外文献。

• 今生如此 (2016-4-08 12:02:29)

  OASIS HLB为waters公司的一种固相萃取柱，适用于中性样品的处理。
  
  该公司描述如下。
  聚合物：亲脂的二乙烯基苯和亲水的N-乙烯基吡咯烷酮
  比表面积：810m/g
  平均孔径：80A
  总孔体积：1.3cm/g
  平均粒径：30um
  PH范围：1-14
  1.独特的水浸润型产品，亲脂和亲水平衡
  2.随着抽干时间的推移，回收率基本保持不变
  3.不怕小柱干涸，不会有其他C18柱碳链塌陷的问题
  4.通过任意调节PH值和有机溶剂含量等途径优化提取方法
  5.解决了各批次之间的重复性
  6.具有极强的通用性
  
  前处理可用乙醇或者甲醇先洗，之后以纯水洗净醇，上样，用适当极性溶剂洗脱即可。本人刚刚用过，不怕干涸，过样品比较容易，不像其他的阻力特别大。

• p1900 (2016-4-08 12:02:50)

  1. 活柱-- ①甲醇 2mL* 3次（一开始抽一点，自然流下）②水 2mL * 3次（自然流下）
  2. 上样 （混合样片缓慢加入）
  3. 洗柱 根据你的样品性质决定，一般洗两次，用量1mL
  4. 抽干
  5. 装收集管
  6. 洗脱 甲醇 1mL + 1mL + 0.5mL （自然洗脱，最后抽干）

• mimima (2016-4-08 12:03:20)

  固相萃取（SPE）类似于HPLC 色谱分离过程，常用反相技术，填料为约40微米的C18等。常用形式是将0.1-0.5g填料装在塑料医用注射器筒中，称为SPE小柱，其原理，相的选择和方法的建立与HPLC相似。
  处理过程如下：
  在加样之前，加数倍柱床体积的甲醇或乙睛，一般为1ml甲醇，使之通过小柱，称为老化，其目的是除去由于小柱贮存过程中可以吸附的杂质，使填料溶剂化，对于反相填料溶剂化是很重要的，因为贮存的干涸的填料对样品保留较弱，重现性也差。
  小柱老化以后，用水或缓冲溶液将甲醇置换，然后将样品水溶液加如小柱，样品溶剂应该为弱溶剂，如水或含有机溶剂小于10%的水溶液，以使溶质强保留在柱上。
  然后用水，缓冲液或中等强度的溶剂洗涤小柱，以除去干扰物。
  最后，用强溶剂洗涤待测成分，注意，如有较待测成分强保留的干扰成分或对HPLC色谱柱有害的成分存在，洗脱溶剂的强度适当，以在洗脱的时候，不洗拖干扰成分。收集的含待测成分的流份通常应蒸发除去有机溶剂，因为洗拖溶剂对随后的HPLC分离溶剂强度太强。
  对于具酸、碱性的怀念过分，调节溶剂的pH 值科改变其保留行为，例如，控pH值使待测成分流利基而强保留。同时，使干扰离子化而弱保留。
  具体步骤可以按上面 PANTHERWW兄的做法或按下面步骤处理：用甲醇1ml老化，水1ml平衡，上样1ml，5%甲醇水溶液1ml洗涤，最后用甲醇1ml洗拖，对酸、碱性成分，可以调节PH值，优化SPE，可以PH范围在0-14。
  对于OasisMCX类SPE，为混合磺酸阳离子交换小柱。用于萃取碱性化合物，步骤为：上样3ml，0.1mol/lHCL3ml洗涤，甲醇2ml洗涤5%NH4OH甲醇溶液2ml洗涤，不需要老化、平衡阶段。
  对于Oasis MAX系列,为混合型季铵阴离子交换小柱，用于萃取酸性化合物，步骤为：甲醇1ml老化，水1ml平衡，上样3ml NaAC（50mmol/l），PH=7的5% 甲醇液洗涤，甲醇2ml，洗拖碱性、中性化合物，100mmol/L磷酸：乙睛（1：1，V/V）2ml，洗拖酸性化合物。 该系列小柱适合于生物体液的药物分析有较高的回收率。