【求助】本人现在做一种药物浓度检测

最新回复

• qinqinai (2016-4-09 10:13:52)

  直接沉淀蛋白的回收率有多高！？乙腈

• huali (2016-4-09 10:14:12)

  直接沉淀就只有30%到40%，就是用乙腈沉淀，而且涡旋之后回收率会降低，容易堵柱子。还用了固相萃取方法，因为该药与蛋白极易结合，所以萃取时候就和蛋白一起洗脱下来，
  请各位大侠给点意见啊，急啊！

• yayayu (2016-4-09 10:14:54)

  可以试一下一定比例的甲醇-乙腈作沉淀剂

• 小熊妮妮 (2016-4-09 10:15:20)

  100 ul sample + 100 ul DMSO + 200 ul ACN
  votex, centrifuge.
  collect supernatant + same amount IS
  injection
  我的样品也是蛋白结合率很高85%。这样处理还不错，有90%的回收率。处理后很干净。

• 哈密瓜 (2016-4-09 10:15:46)

  内标怎么是在最后才加啊，不是在沉淀蛋白前就加吗？

• mimima (2016-4-09 10:16:10)

  应该先加后加可以看情况都可以接受的吧。

• 跳跳哈里 (2016-4-09 10:16:33)

  请教一下countrywolf2005,DMSO在这里的作用是什麽啊

• hcy517 (2016-4-09 10:16:55)

  我的药物水溶性很差，所以stock solution是用DMSO配制而成的。我开始也尝试用乙腈沉淀蛋白，但是得出来的线性很差，所以采用加入DMSO发现效果很好。
  猜想药物在其中溶解性很大，所以对于药物的提取比较好。不知道对不对，请大家指正。
  问楼上，你有没有试一下，结果怎么样？

• xgy412 (2016-4-09 10:17:17)

  后来尝试了这个方法，回收率不见提高，这个药既是水溶性也是脂溶性，现在加SDS过柱也只有20%的回收率，不知道大家还有什么好方法啊