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[求助]关于有关物质方法学验证
[求助]关于有关物质方法学验证---耐用性试验如何评价的问题[求助]关于有关物质方法学验证
各位：
在药监局的一篇电子刊物中写道：有关物质耐用性试验 分别考察流动相比例变化±5％、流动相pH值变化±0.2、柱温变化±5℃、检测波长变化±5nm、流速相对值变化±20％以及采用三根不同批号的色谱柱进行测定时，仪器色谱行为的变化，每个条件下各测试两次。可接受的标准为：各杂质峰的拖尾因子不得大于2.0，杂质峰与其他成分峰必须达到基线分离；各条件下的杂质含量数据（n=6）的相对标准差应不大于2.0%，杂质含量的绝对值在±0.1％以内。
我最近做一个品种的有关物质的耐用性试验，本法采用自身对照法，梯度洗脱，如改变流速其6份样品的总杂质为0.51%，0.53%，0.52%，0.50%，0.52%，0.49%，其平均值为0.51%，RSD为2.9%。
请问：各条件下的杂质含量数据（n=6）的相对标准差应不大于2.0%，杂质含量的绝对值在±0.1％以内。对这句话如何理解？我做的这组数据是否符合要求？自身对照法测有关物质必须做耐用性试验吗？请大家指点，万分感谢！
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最新回复
zzzz (2011-11-02 14:34:09)
但是鉴于你的杂质都0.5%，估计偏差不应该那么大吧。
但可能由于主峰面积不是很大，导致杂质的峰面积很小，进一步照成杂质峰面积的偏差比较大。这种时候有必要调整进样量。
或者适当情况下不一定照搬那些要求，只要能说服自己说服审评老师就行。
ero11 (2011-11-02 14:35:24)
我也出现过和你同样的问题，其他帖子问过，答复不是太理想，我目前只考察了分离度、理论塔板数和拖尾因子，个人感觉是符合ICH的规定的，再说也能达到这个要求，杂质含量的绝对值在±0.1％以内。还有在杂质定量那文中，重复性试验的RSD为不大于15%。同一条件尚且如此，何况不同条件。所以我觉得没必要死扣这个条件。
[ 本帖最后由 ero11 于 2011-11-2 14:37 编辑 ]
mimili_901 (2011-11-02 14:35:57)
zzzz (2011-11-02 14:37:48)
因为，如果样品溶液中杂质仅为0.01%，就无法进行耐用性试验。而用杂质对照品溶液还是可以考察的，只要这个杂质对照品在此条件下符合要求，样品溶液也应该符合要求。
以上是个人拙见，望高手指正！
summerxx (2011-11-02 14:39:40)
木槿 (2011-11-02 14:40:20)
就是否应该做耐用性，我认为还是需要做的，比如不同波长下，杂质峰与主峰吸收强度有可能是不一致的，这就会使自身对照条件下测定的杂质峰含量有明显不同。有时候在±5nm波长下是会出现这种情况的。如果说在不同波长下，杂质的吸收与主峰吸收都同时变大或变小，自身对照测定的结果基本一致的话，说明在波长变化的情况下耐用性好，如果杂质峰吸收变强了，而主峰的吸收反而变弱了，呵…………，有问题了， 这种情况在检测波长较短的情况下比较常见。
bananapeople (2011-11-02 14:40:52)
就是否应该做耐用性，我认为还是需要做的，比如不同波长下，杂质峰与主峰吸收强度有可能是不一致的，这就会使自身对照条件下测定的杂质峰含量有明显不同。有时候在±5nm波长下是会出现这种情况的。如果说在不同波长下，杂质的吸收与主峰吸收都同时变大或变小，自身对照测定的结果基本一致的话，说明在波长变化的情况下耐用性好，如果杂质峰吸收变强了，而主峰的吸收反而变弱了，呵…………，有问题了， 这种情况在检测波长较短的情况下比较常见。
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杂质定量的重复性及中间精密是重复配样的，特别对于杂质量很小的样品误差很大，故要求RSD值为15%。一般耐用性试验是采用同一样品进样6针，故RSD要求为2%。
还有杂质相差要求不得过±0.1%，应是指的各条件下测得的平均值相比。
木槿 (2011-11-02 14:41:59)
还有杂质相差要求不得过±0.1%，应是指的各条件下测得的平均值相比。
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bananapeople 说的也不错，耐用性是同一个样品进样
如果 一个样品测定的结果是 0.11%，0.11%，0.12%，0.10%，0.10%，0.10%，这六组数从结果上看，大家认为相差的大吗？RSD值 7.65 测杂质含量这么小的数据， RSD要在2%以内难度还是不小呀！
mooon (2011-11-02 14:42:20)
和重复性一样测定了不同的六份样品啊
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