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【求助】扫描电镜是否省掉真空干燥直接喷金
前段时间做了下扫描电镜,制片用的是别人文章里比较简化的方法:2.5%戊二醛4度固定过夜,磷酸缓冲液漂洗三次,然后逐级脱水30%、50%、70%、90%乙醇各一次,100%乙醇两次,每次20min,最后真空干燥后就喷金观察。我的菌是丝状真菌,制片的时候是从固体平板菌落上切一块长宽大约0.5mm的琼脂小块,进行固定脱水等,可是上电镜后发现孢子形态还好,但是菌丝都变形很严重,好的片子菌丝应该是饱满的,我做的都塌陷扁掉了,负责电镜的老师说是没固定好,但他不是做生物的所以也说不好到底怎么做,所以想请教下各位高手:【求助】扫描电镜是否省掉真空干燥直接喷金
怎样才能得到质量较好的没变形的菌丝片子?
我的戊二醛是05年的,不知是否对固定有影响?
琼脂小块脱水完后还是平的,但是一真空干燥变卷曲了,是否省掉真空干燥直接喷金?
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最新回复
今生如此 (2016-4-27 11:18:01)
n111 (2016-4-27 11:18:22)
我固定过夜了啊,时间还不够吗?
huali (2016-4-27 11:18:42)
yayayu (2016-4-27 11:19:16)
大大 (2016-4-27 11:19:37)
yazi (2016-4-27 11:19:59)
女儿情 (2016-4-27 11:20:21)
灵魂 (2016-4-27 11:20:42)
p1900 (2016-4-27 11:21:02)
yuanyuan (2016-4-27 11:21:27)
大大 (2016-4-27 11:21:51)
这是我的一个结果。很丰满哦!
xiaoxiaoai (2016-4-27 11:22:13)
美人鱼 (2016-4-27 11:22:40)
青青草 (2016-4-27 11:23:04)
另外,如果你的样品胞外聚合物水溶性物质很多的话,建议用乙酸乙酯脱水。。酒精洗会洗掉大部分的胞外物质
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