[求助]液相色谱提问

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• 131415 (2011-11-05 08:53:50)

  估计你的流动相是有pH值的或其他离子对试剂什么的，而你的药物对这些比较敏感，这并不奇怪，我以前遇到过一个药对有机相特别敏感，稍微有些变化都引起保留时间的很大不同。所以在试验中，流动相最好一个人配，而且所用的量筒啊什么的都尽量使用同一个，也就是说不要这次配用的是一个量筒，下次配时又是另个不同的量筒，尽量减少系统误差，人为误差。
  其次，色谱柱不要换，对于难平衡的，应尽可能的平衡时间长些，尤其是含有离子对试剂的流动相。

• @STAR@ (2011-11-05 08:54:10)

  我告诉你吧
  你先看看，是不是管路堵了，看看喷雾正常吗？测测流速正常吗？
  再看看氮气罐压力够不够？
  
  如果堵了，加大流速冲洗，或者更换peek管路。

• 2541 (2011-11-05 08:54:26)

  同意二楼的说法，尤其是有离子对试剂的，难平衡，而且不同时间进样出峰时间变化很大，建议多平衡一段时间，尽量使用同一套工具操作。

• 云端ing (2011-11-05 08:54:45)

  我们在做实验的时候也遇到过这样的问题，没有找到原因，流动相里用了缓冲盐，出峰时间和峰形在前一天和当天上午一样，但是下午就不一样，我觉得和流动相是有关系的，先是柱子可能没平衡好，再者换了流动相，虽然是同个人配的，但是调节pH时用磷酸，加的量就不好控制的那么准了

• 张先生 (2011-11-05 08:55:12)

  可能是对酸碱度比较敏感，可以考虑调节酸碱度；另外柱子内部环境，上样中间冲柱子时间不同内部离子对平衡不同；

• 131415 (2011-11-05 08:55:39)

  "估计你的流动相是有pH值的或其他离子对试剂什么的，而你的药物对这些比较敏感，这并不奇怪，我以前遇到过一个药对有机相特别敏感，稍微有些变化都引起保留时间的很大不同。所以在试验中，流动相最好一个人配，而且所用的量筒啊什么的都尽量使用同一个，也就是说不要这次配用的是一个量筒，下次配时又是另个不同的量筒，尽量减少系统误差，人为误差。
  其次，色谱柱不要换，对于难平衡的，应尽可能的平衡时间长些，尤其是含有离子对试剂的流动相。"
  谢谢各位大侠的指点，我现在还想进一步问一下，我实验的流动相配置“乙腈/水/三氟乙酸 15/85/0.1”，这种非缓冲液流动相也需要随时使用随时配制嘛？上一次非同一个人用过此液相仪器会对我的试验结果造成影响嘛？再就是“平衡时间长些”该长到什么程度，也就是等到基线稳定多久才可以进样品？

• 04906 (2011-11-05 08:56:25)

  含三氟乙酸的流动相是需要现用现配的，因为三氟乙酸时间长了会被氧化，从而对分析结果产生影响  

• 紫烟 (2011-11-05 08:58:01)

  "估计你的流动相是有pH值的或其他离子对试剂什么的，而你的药物对这些比较敏感，这并不奇怪，我以前遇到过一个药对有机相特别敏感，稍微有些变化都引起保留时间的很大不同。所以在试验中，流动相最好一个人配，而且所用的量筒啊什么的都尽量使用同一个，也就是说不要这次配用的是一个量筒，下次配时又是另个不同的量筒，尽量减少系统误差，人为误差。
  其次，色谱柱不要换，对于难平衡的，应尽可能的平衡时间长些，尤其是含有离子对试剂的流动相。"
  谢谢各位大侠的指点，我现在还想进一步问一下，我实验的流动相配置“乙腈/水/三氟乙酸 15/85/0.1”，这种非缓冲液流动相也需要随时使用随时配制嘛？上一次非同一个人用过此液相仪器会对我的试验结果造成影响嘛？再就是“平衡时间长些”该长到什么程度，也就是等到基线稳定多久才可以进样品？
  
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  首先流动相有机相比例比较少，所以有机相挥发一些的话也会对保留时间造成影响，然后三氟乙酸本身就有很强的挥发性会造成每次的一定误差，但加入其他溶剂后，三氟乙酸的挥发性就基本消除了。还有就是你本身的样品可能对酸碱比较敏感。
  其他人使用液相，如果仪器正常的话，是不会对你的实验造成影响的。建议流动相可以一次多配一些。
  还有就是如果不是当天试验的话，保留时间略有差异是可以的。只要相对保留时间没有明显变化就可以了。

• yjf1026 (2011-11-05 08:59:28)

  就是因为出峰的时间差异太大了，开始跑标准曲线的时候出峰时间在9分钟左右，等再次试验的时候出峰时间竟然是2分钟，所以觉得差异太大