[求助]有谁用HPLC-ELSD测过氨基酸吗？

最新回复

• DDD (2011-11-05 17:24:22)

  一定要用ＥＬＳＤ吗？灵敏度不高的。ＵＶ或者衍生化做荧光不行吗？  

• bananapeople (2011-11-05 17:24:40)

  比较麻烦，主要是香精中的成分特别复杂，先前用气质打出的峰太多，怕衍生化后也难以分开，想试试用ELSD来检测。

• DDD (2011-11-05 17:25:02)

  ｅｌｓｄ也没办法定性阿，我觉得还是摸一下前处理的条件，氨基酸分析方法的文章应该很多的吧

• =菓子= (2011-11-05 17:30:02)

  从理论上讲是可行的,曾经做过精氨酸的ELSD测定,虽然含量较高,最后也因无法达到理想要求而放弃.
  实际操作有些困难:
  1\您说香精中的成分特别复杂，如果直接进样测定,恐怕难以分开,烟草也许也差不多.
  2\如果氨基酸的含量不高,需要对色谱条件及ELSD条件做细致的研究,如果多种氨基酸并存,分离也相当困难.
  ...
  其实peterhello说的很好,采用其他方法也很简单,方法也很成熟.

• @STAR@ (2011-11-05 17:30:20)

  你好啊,
  我作过amino acid分析,就是用的HPLC-ELSD,效果还可以的,也发SCI文章了,
  条件是: 采用PrevailTMC18色谱柱（250mm×4.6mm i.d., 5μm），以乙腈-0.7%三氟醋酸溶液（含5.0mmol/L七氟丁酸）为流动相进行线性梯度洗脱，流速为0.8mL/min，在漂移管温度115℃、氮气流量2.5L/min条件下，在25min内即可完成对17种氨基酸的分离测定。氨基酸质量浓度为0.071g/L～2.285g/L时，其峰面积的对数值与质量浓度的对数值线性关系良好；17种氨基酸的加样回收率为93.1%～107.9%；信噪比为3时，测得氨基酸的最低检测限介于20.1mg/L～56.6mg/L之间。该法不需要对氨基酸衍生化处理，快速、简便、准确.
  希望对你有用!

• HP007 (2011-11-05 17:30:53)

  你好啊,
  我作过amino acid分析,就是用的HPLC-ELSD,效果还可以的,也发SCI文章了,
  条件是: 采用PrevailTMC18色谱柱（250mm×4.6mm i.d., 5μm），以乙腈-0.7%三氟醋酸溶液（含5.0mmol/L七氟丁酸）为流动相进行线性梯度洗脱，流速为0.8mL/min，在漂移管温度115℃、氮气流量2.5L/min条件下，在25min内即可完成对17种氨基酸的分离测定。氨基酸质量浓度为0.071g/L～2.285g/L时，其峰面积的对数值与质量浓度的对数值线性关系良好；17种氨基酸的加样回收率为93.1%～107.9%；信噪比为3时，测得氨基酸的最低检测限介于20.1mg/L～56.6mg/L之间。该法不需要对氨基酸衍生化处理，快速、简便、准确.
  希望对你有用!
  
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  有基质吗？还是标准品？

• #问号# (2011-11-05 17:31:23)

  请问对柱子的要求很严格吗？一定要用你说的那根柱子吗，我们实验室有根waters的
  atlantis C18也是分离极性化合物的，PH范围也很宽，不知道可不可以替代prevail TMC18呀？

• dog002 (2011-11-05 17:31:56)

  你好啊,
  我作过amino acid分析,就是用的HPLC-ELSD,效果还可以的,也发SCI文章了,
  条件是: 采用PrevailTMC18色谱柱（250mm×4.6mm i.d., 5μm），以乙腈-0.7%三氟醋酸溶液（含5.0mmol/L七氟丁酸）为流动相进行线性梯度洗脱，流速为0.8mL/min，在漂移管温度115℃、氮气流量2.5L/min条件下，在25min内即可完成对17种氨基酸的分离测定。氨基酸质量浓度为0.071g/L～2.285g/L时，其峰面积的对数值与质量浓度的对数值线性关系良好；17种氨基酸的加样回收率为93.1%～107.9%；信噪比为3时，测得氨基酸的最低检测限介于20.1mg/L～56.6mg/L之间。该法不需要对氨基酸衍生化处理，快速、简便、准确.
  希望对你有用!
  
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  请问您的流动相pH是多少呢？我看过您的这篇文章，如果想用质谱检测的话，可以参考该流动相吗？