[求助]HPLC基线抬高,怎么办?

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LC2010的仪器,流动相是甲醇-磷酸盐缓冲液=25:75 等度洗脱,柱子是平衡好了的。每次进几个样品开始是好的,但是走到第3个小时左右就出现基线上漂,抬高到另外一个平台,并且基线开始出现不规则小波动,影响检测限的测定,这可能是什么原因,该怎么解决呢?几次做下来都是这样的情况,还望各位大侠帮助分析~
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最新回复

  • KGZ564 (2011-11-15 17:37:12)


    不好意思,是基线抬高
  • 木槿 (2011-11-15 17:37:44)

    是不是进气泡了?

    检测器氘灯使用时间还长
  • october7 (2011-11-15 17:38:09)

    压力有木有跟着变化?
    磷酸盐缓冲液貌似平衡很慢。3小时之前看看出峰时间是否稳定,不稳定说明没有平衡好!
  • tie8 (2011-11-15 17:38:30)

    仪器正常的话,很可能是前面没有洗脱出的杂质。可以通过DAD看下紫外吸收是否和基线平稳处完全一致
  • KGZ564 (2011-11-15 17:38:50)

    是不是进气泡了?

    检测器氘灯使用时间还长?

    波动没有规律,灯刚换的。。。气泡这个原因还没有排除
  • KGZ564 (2011-11-15 17:39:09)

    压力有木有跟着变化?
    磷酸盐缓冲液貌似平衡很慢。3小时之前看看出峰时间是否稳定,不稳定说明没有平衡好!

    ========================================================================================

    3小时之前的谱图很正常,后来就先基线抬高,不规则的波动,冲完柱后第二天使用前3小时后,问题就又出现了。。。
  • 木槿 (2011-11-15 17:39:29)

    气泡的可能比较大,有脱气机吗?

    什么泵?
  • join (2011-11-15 17:39:49)


    1:3小时后过一段时间有改善?
    2:外界环境是否有变化,如温度等?
    3:流动相脱气状况?
    4:检测波长为末端吸收?试剂的级别?
  • xevin (2011-11-15 17:40:09)

    2:外界环境是否有变化,如温度等?
    环境温度变化基线应该是随着温度慢慢抬高的,楼主的这个貌似突然变化的。
  • 我佛慈悲 (2011-11-15 17:40:41)


    查一下气泡。
  • bananapeople (2011-11-15 17:41:03)

    梯度用水比等度时的要求高,不妨考虑下!!!
  • 2541 (2011-11-15 17:41:23)

    每次都是进该样品以后都是3个小时以后出现基线抬高的话,很可能是样品的问题。

    可能是样品中含有一些难洗脱的物质在该比例流动相的洗脱下,三小时后被洗脱出来,而该物质在流动相中已经扩散成一个平台。

    可以试试只走流动相4个小时看看基线有没有抬高。
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