混浊样品如何用紫外可见分光光度计来测定

用单波长紫外分光光度法测定药物含量时，要求被测溶液为澄明溶液，否则测定结果误差将会很大。但是，由于药物中成分复杂，特别是中药材及其制剂，从而给分光光度法带来一定的困难。这时，一般分析人员会采用各种分离分析手段对样品进行前处理；有条件的可以用积分球的办法收集散射光，或者用乳白玻璃法减轻散射的影响。但是，这些方法耗时、耗力，又不能从根本上解决问题。
    1951年B.Chance及其同事为了研究细胞色素，对仪器和测定技术作了进一步的改进，摸索了双波长法，试制了第一台双波长分光光度计。以后，1995年Bulter和Bruit教授用此法来测定水果成熟的程度。双波长法解决了由于样品混浊而引起的测定误差。
    双波长法不用参考溶液，是两个不同波长的单色光交替通过代测的混浊样品，然后对通过此样品的两个波长的吸收信号进行测量并加以比较。如把一个波长λe选在欲测组分吸收带的峰值上，另一波长λR选在欲测组分吸收带的凹谷上，这两个波长的光束通过样品后所引起的吸收信号差就应该仅仅是欲测的特征信号了。