[求助]关于THP-1冻存前的一点小疑问

最新回复

• 小鱼鱼 (2012-2-07 16:44:47)

  
  我养悬浮细胞，天天离心换液，没有一点问题！

• Ao7 (2012-2-07 17:04:46)

  
  怎么叫“一般认为”，我们这边复苏效果很好的

• ending (2012-2-07 17:05:09)

  
  呵呵，我问过周围人,离心完后,镜下会出现黑色的团状物,似乎是死了的细胞团,而且数量还不少哟,所以我一般不敢去离心
  2楼的朋友,天天离心细胞还不死,真的佩服你,呵呵

• 小鱼鱼 (2012-2-07 17:05:30)

  
  死了的细胞团是没离心前就出现了的，离心后不可能看得到细胞团。离心后不是要打散细胞吗？既然打散了你又怎么看得到细胞团？如果你的细胞真的成团的死亡，更应该离心换液，把毒性物质去除掉。离心对细胞是有损伤，但并不是那么大。如果你的细胞连离心都承受不了，状态肯定不好，趁早别冻存了。我养悬浮细胞快半年了，几乎每天都用1000转离心5分钟，有时候用1500转，2000转也用过，一点问题都没有。

• ending (2012-2-07 17:05:48)

  
  是离心后,放入培养箱培养后,在镜下发现有黑色的团状物,且肯定不是污染，因为连续培养3天,细胞密度非常高了.所以不能够确定到底是什么?恳请赐教
  
  另外,我也非常佩服楼上的这位朋友,THP-1都是喜酸,换液一次后,应该静置培养3天,待培养液变黄后再离心换液.有机会非常想向楼上的大哥学习学习.小弟养THP-1两个星期,承蒙上帝厚爱,一直没有被污染.阿门

• 小鱼鱼 (2012-2-07 17:06:32)

  我没有养THP－1，我养的是HL－60，一种很好养的细胞，24小时就长满了，不换液不行啊。曾经有一次偷懒，第3天才换液，细胞都死得差不多了。肿瘤细胞长得快，应该天天换液。
  你说的黑色团状物就是抱团死亡的细胞。有时候是细胞生长不好，抱团死亡，有时候是成簇生长的悬浮细胞越来越大团，位于中间的细胞营养吸收障碍逐渐死亡，这跟离心是没有什么关系的。离心只是有一些细胞离不下来，数量减少而已。800～1000转离心对状态好的细胞没什么影响。
  

• ending (2012-2-07 17:06:57)

  
  原来如此,细胞种类都不同哟.那你细胞长的这么快,的确是要天天换啊.
  抱团死亡的细胞我在平时的镜下看的很明显,而且颜色也不是黑色,只是比正常细胞稍微暗点.而离心后就出现黑色的团状物(离心前看不到),所以小弟一直不得其解.不过,根据周围养THP-1的学长说,不影响细胞生长.不过,小弟还是想知道其所以然.
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• ending (2012-2-07 17:07:13)

  
  复苏第二天观察：细胞碎片很多，不过密度还行

• zwsyrt (2012-2-07 17:08:26)

  
  我也出现过和楼上一样的问题，离心后出现渣子，不是污染，不得其解

• kulee (2012-2-07 17:08:58)

  
  我现在养THP1 细胞，培养液一天就开始黄，只好每天都离心换液，不过感觉就是细胞生长比较慢，还没出现过楼主说的抱团死亡的情况

• rxcc33 (2012-2-07 17:09:21)

  不要经常换液比较好啊。