[讨论帖]吹打细胞用什么最好呢

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• 00无名指00 (2012-2-12 13:00:35)

  
  我用过枪和3ml的那种巴氏吸管，养的是贴壁的肿瘤细胞，感觉如下：
  1、更喜欢用枪，枪口细，冲激力大，可以把贴的很牢的细胞吹下来，如果用吸管的话有时根本没效果
  2、把细胞吹成悬液的时候，也更喜欢用枪，感觉枪吸得更均匀，估计也是因为口比较小
  3、用枪时要小心，如果吸得太快，枪头没放好位置，有时会把液体吸得一下子冲了上来，超过了枪头，弄到枪里面，这样可能会污染，吸管不存在这种问题
  4、枪比较适合25mm2的瓶和60mm的皿，或更小的瓶或皿，大瓶大皿的话因为液体多，面积体积大，用枪操作很不方便

• 铜雀 (2012-2-12 13:01:00)

  
  感谢群友的分享，可是枪的冲击力会不会太大啊，细胞在消化是就受到一枚的作用 受损，再用枪会不会对细胞不好啊？

• 00无名指00 (2012-2-12 13:01:37)

  我养过Hela 8910 8910PM OVCAR3，没有看出有明显的不良效果

• whitesheep (2012-2-12 13:01:55)

  
  用移液枪比较容易将细胞吹散。移液管吹的速度慢，而且细胞容易抱团。

• 黄花菜 (2012-2-12 13:02:12)

  
  看到我们实验室有用两毫升移液管的，不知道可不可以啊？

• any333 (2012-2-12 13:02:34)

  
  我觉得用移液枪就行，只是不要吹得太猛，不起泡泡就行。

• 911 (2012-2-12 13:03:22)

  我用过枪和3ml的那种巴氏吸管，养的是贴壁的肿瘤细胞，感觉如下：
  1、更喜欢用枪，枪口细，冲激力大，可以把贴的很牢的细胞吹下来，如果用吸管的话有时根本没效果
  细胞消化重悬的话，最好还是采用移液管，至于2ml、5ml或者10ml移液管，关系没那么大，主要是1ml移液枪的枪头口太小，对细胞冲击力太大，必须使用的状况下力度一定要控制好。巴氏吸管也可以。
  你说的贴的很牢的细胞必须用枪吹打下来，很大可能是你的消化不够，这种状况下即使你用枪可以把细胞吹打下来，对于细胞的损伤作用也是非常非常大的。一般消化结束时轻拍培养皿可以观察到细胞开始移动，
  2、把细胞吹成悬液的时候，也更喜欢用枪，感觉枪吸得更均匀，估计也是因为口比较小
  一般传代培养将细胞吹打成细胞悬液时只需要3~4细胞的悬液即可，不用完全制成单细胞悬液。
  3、用枪时要小心，如果吸得太快，枪头没放好位置，有时会把液体吸得一下子冲了上来，超过了枪头，弄到枪里面，这样可能会污染，吸管不存在这种问题
  对，枪操作不小心的话比较容易造成污染，另外不管是移液管、枪、巴氏管吹打细胞时，都要尽量避免产生气泡，气泡产生一方面增加了污染的概率，另一方面气泡破了后瞬间对于细胞的冲击力也是挺大的。
  4、枪比较适合25mm2的瓶和60mm的皿，或更小的瓶或皿，大瓶大皿的话因为液体多，面积体积大，用枪操作很不方便
  枪的话，一般是在35mm dish、孔板培养的细胞培养中采用的比较多，因为这时培养的面积太少，无法用移液管进行操作。T25、60mm dish用5ml移液管操作还是比较方便的

• 00无名指00 (2012-2-12 13:04:01)

  我用过枪和3ml的那种巴氏吸管，养的是贴壁的肿瘤细胞，感觉如下：
  1、更喜欢用枪，枪口细，冲激力大，可以把贴的很牢的细胞吹下来，如果用吸管的话有时根本没效果
  细胞消化重悬的话，最好还是采用移液管，至于2ml、5ml或者10ml移液管，关系没那么大，主要是1ml移液枪的枪头口太小，对细胞冲击力太大，必须使用的状况下力度一定要控制好。巴氏吸管也可以。
  你说的贴的很牢的细胞必须用枪吹打下来，很大可能是你的消化不够，这种状况下即使你用枪可以把细胞吹打下来，对于细胞的损伤作用也是非常非常大的。一般消化结束时轻拍培养皿可以观察到细胞开始移动，
  2、把细胞吹成悬液的时候，也更喜欢用枪，感觉枪吸得更均匀，估计也是因为口比较小
  一般传代培养将细胞吹打成细胞悬液时只需要3~4细胞的悬液即可，不用完全制成单细胞悬液。
  3、用枪时要小心，如果吸得太快，枪头没放好位置，有时会把液体吸得一下子冲了上来，超过了枪头，弄到枪里面，这样可能会污染，吸管不存在这种问题
  对，枪操作不小心的话比较容易造成污染，另外不管是移液管、枪、巴氏管吹打细胞时，都要尽量避免产生气泡，气泡产生一方面增加了污染的概率，另一方面气泡破了后瞬间对于细胞的冲击力也是挺大的。
  4、枪比较适合25mm2的瓶和60mm的皿，或更小的瓶或皿，大瓶大皿的话因为液体多，面积体积大，用枪操作很不方便
  枪的话，一般是在35mm dish、孔板培养的细胞培养中采用的比较多，因为这时培养的面积太少，无法用移液管进行操作。T25、60mm dish用5ml移液管操作还是比较方便的
  
  1、在我自己养过的几种细胞里，以我的个人经验看来，消化时间长对细胞的损伤远大于用枪吹的损伤，所以对于难消化的细胞我是倾向于多吹，而不是多消化。一般消化当然是敲敲瓶皿就能解决了，但是不是所有细胞都这么乖的
  2、别的吸管/移液管我没用过，我用3ml的巴氏吸管的话，远不能做到把细胞吹成3－4细胞的悬液

• 911 (2012-2-12 13:04:24)

  1、在我自己养过的几种细胞里，以我的个人经验看来，消化时间长对细胞的损伤远大于用枪吹的损伤，所以对于难消化的细胞我是倾向于多吹，而不是多消化。一般消化当然是敲敲瓶皿就能解决了，但是不是所有细胞都这么乖的
  2、别的吸管/移液管我没用过，我用3ml的巴氏吸管的话，远不能做到把细胞吹成3－4细胞的悬液
  
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  1. 你说的难消化的细胞你倾向于多吹，也还是要看消化不够的程度，如果细胞消化不够强行将细胞从皿底吹下，对于细胞的状态影响相当相当大。消化过度对于细胞状态的影响当然会相当大，所以一般消化的时候对于之前没养过的细胞，第一次开始传代的时候，是要每30 s ~ 1 min观察一次的，这样才不至于使细胞消化过度，以轻拍刚好可观察到细胞移动的时间为准。
  所以，对于新手而言，掌握好细胞的消化时间是一个相当重要的事情。
  2. 巴氏管因为管子比较软，相对移液管而言更温和些，有些细胞可能比较难以吹打成3~4细胞悬液。另外3ml巴氏管在吹打比较大体积的细胞悬液（比如10ml）时因为体积相差太大，也增加了吹打成单细胞或者3~4细胞悬液的难度。
  总之，如果要采用1ml枪吹打细胞细胞悬液的话，切吸和吹都要温和些。

• 白白的 (2012-2-12 13:15:08)

  
  用过枪和滴管。个人比较喜欢用枪，比较容易控制力道而且不会吹出很多气泡。