[求助]293细胞不贴壁的原因有几种？

最新回复

• jujuba (2012-3-10 15:54:43)

  
  会不会是细胞数量过少？
  我传代时细胞数目过少两天都不贴壁，后来加了些细胞就开始贴壁了
  我的是Ａ549细胞

• zzzz (2012-3-10 15:55:04)

  
  应该不是细胞数量的问题，现在满瓶都是漂浮的细胞，类似于HL-60。

• ha111 (2012-3-10 15:56:12)

  可能是温度问题
  293不耐低温,室温下操作就了都会飘
  如果是新复苏的细胞还可以考虑下冻存是操作有没有失误

• yapuyapu (2012-3-10 15:56:31)

  
  293细胞的培养液：
  Minimum essential medium (Eagle) with 2 mM L-glutamine and Earle's BSS adjusted to contain 1.5 g/L sodium bicarbonate, 0.1 mM non-essential amino acids, and 1.0 mM sodium pyruvate, 90%; heat-inactivated horse serum, 10%
  
  温度和二氧化碳：
  37.0C， 95%; carbon dioxide (CO2), 5%
  
  生长条件：
  The cell line does not adhere to the substrate when left at room temperature for any length of time, therefore, live cultures may be received with the cells detached.The cells will re-attach to the flask over a period of several days in culture at 37C.
  
  该细胞贴壁时间在7天左右！！！
  
  如还有问题，请PM我

• zzzz (2012-3-10 15:57:12)

  
  今天是第十天了，可是还没有贴壁。
  每天都在孵箱里。现在每天只看一次，还特别小心。
  根本就没有在室温下操作。

• bananapeople (2012-3-10 15:57:29)

  
  如何知道是活的？

• vivian4123 (2012-3-10 15:57:56)

  同意楼上的, 你怎么确定细胞还是活的？
  建议复苏,我的293 一般最迟两天贴壁, .
  你的培养基PH值是不是偏碱? 偏碱的话对293很不利的.

• xevin (2012-3-10 15:58:44)

  细胞呈亮点状漂浮。
  培养基是橘红色，偏碱吗？

• cj_mondy (2012-3-10 15:59:04)

  
  建议换新的细胞株，由于国内没有建株的293，而从国外引进的往往经过多次传代，细胞株的质量就很差。293 传代过多，就会出现无理由的差。

• mimili_901 (2012-3-10 16:00:59)

  
  细胞消化过度，细胞状态不好？