[求助]我的细胞是何种污染，如何处理？

最新回复

• cj_mondy (2012-3-15 12:57:10)

  
  很可能是黑胶虫污染，理由如下：
  
  低倍镜下看到很多小黑点；细胞状态不好；
  
  你还可以通过培养液的澄清情况、黑点在高倍镜的运动情况来进一步判断，请参考http://www.dxy.cn/bbs/topic/20238771 ，解决方法亦可参考！

• skytree (2012-3-15 12:57:31)

  感觉像是真菌污染，赶紧地该处理的就处理了吧，别影响了其他在养的细胞。
  
  先检查下整个培养的体系吧，比如你的培养基，血清，PBS，胰酶等细胞直接接触的环境，排除没有问题的话再复苏下冻存的细胞，最好这一批还有其他批次的都复苏下，以便于确定是不是这批冻存的细胞除了问题。如果其他人的细胞也发生污染了，可能还是得处理下培养箱以及超净工作台。操作方面，严格无菌操作， 不放心的话可以请你们实验室其他操作比较细致的人同时帮你操作下作为对照。

• 00无名指00 (2012-3-15 12:58:20)

  感觉像是真菌污染，赶紧地该处理的就处理了吧，别影响了其他在养的细胞。
  先检查下整个培养的体系吧，比如你的培养基，血清，PBS，胰酶等细胞直接接触的环境，排除没有问题的话再复苏下冻存的细胞，最好这一批还有其他批次的都复苏下，以便于确定是不是这批冻存的细胞除了问题。如果其他人的细胞也发生污染了，可能还是得处理下培养箱以及超净工作台。操作方面，严格无菌操作， 不放心的话可以请你们实验室其他操作比较细致的人同时帮你操作下作为对照。
  
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  在高倍镜下集落仍然为密密麻麻的小黑点，无真菌状的明确结构。培养两天的情况下培养基澄清且不变黄，细胞消化后可继续贴壁培养，状态同样不佳。培养条件为DMEM高糖+5%FBS+青链双抗。若用抗真菌药物处理会不会挽救过来？因细胞珍贵，不忍丢弃。谢！上传高倍镜图片：

  
  45975390.snap.jpg

• 00无名指00 (2012-3-15 12:58:45)

  中间密集黑点为污染物较为密集的集落。

• 00无名指00 (2012-3-15 12:59:10)

  很可能是黑胶虫污染，理由如下：
  
  低倍镜下看到很多小黑点；细胞状态不好；
  
  你还可以通过培养液的澄清情况、黑点在高倍镜的运动情况来进一步判断，请参考http://www.dxy.cn/bbs/topic/20238771 ，解决方法亦可参考！
  
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  谢谢你的回复，刚刚看过贵贴。感觉不是黑胶虫，黑点成集落分布，散在的较少，没有观察到布朗运动，培养基澄清。刚刚上传高倍镜图片，请帮助。

• yhz1973 (2012-3-15 12:59:38)

  
  感觉像是真菌污染。

• caihong (2012-3-15 13:00:05)

  
  你的细胞培养密度高不高？ 会不会是被挤起来的漂浮细胞及死细胞？

• fei1226com (2012-3-15 13:00:28)

  如果在动，一般都是细菌或黑胶虫，如果没动，一般是真菌，呵呵。 很粗俗的见解。。。

• S6044 (2012-3-15 13:00:57)

  
  这种点我们实验室当作支原体感染的表现之一，加抗支原体药后好转

• tieshazhang (2012-3-15 13:01:27)

  
  我看倒更像是念球菌污染哦

• cj_mondy (2012-3-15 13:02:01)

  谢谢你的回复，刚刚看过贵贴。感觉不是黑胶虫，黑点成集落分布，散在的较少，没有观察到布朗运动，培养基澄清。刚刚上传高倍镜图片，请帮助。
  
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  哦，若你判断没问题，这么来说可能不是黑胶虫污染。从你的观察也不像是真菌污染。你的FBS的量应该少了，一般也得10%，可能是因此影响细胞生长，导致大量细胞碎片的产生，进而也可能产生你看见的现象！

• woshituzhu (2012-3-15 13:02:19)

  
  应该是霉菌污染，这个东西很讨厌，用双抗是没有用的，只能赶紧弃掉，不然会污染其他实验用品。而且这个东东很容易往周围扩散。