[求助]关于MTT需不需要同步化的问题

最新回复

• milkdog (2012-3-20 10:59:34)

  是否需要去血清同步化要根据实验目的、所用细胞系等等都有关；
  对于研究周期相关的一般都需要血清饥饿使细胞停滞于G0/G1期——细胞在有血清的环境中生长时，细胞周期处于G0期或者细胞周期末进入新的周期；去血清使细胞处于G0/G1期，这是细胞的自身保护状态，不同细胞的耐受时间，血清最低浓度都有所不同；
  
  至于细胞周期的一些信息可以上百度或者Google等

• star#room (2012-3-20 11:01:04)

  
  你说的这些我都明白，但你能具体说一下，举个例子也行。为什么要把细胞阻滞于G0/G1期？这样做的目的到底是什么呢？
  我看到几个实验：1、大鼠原代培养的神经元缺氧复氧模型，观察药物保护作用时的MTT
  2、小鼠心肌细胞TNF损伤模型,观察药物保护作用的MTT
  3、抗癌药物筛选时做MTT
  这些实验都用了去血清培养，这是为什么?您能给解释一下么？

• 一叶 (2012-3-20 11:07:33)

  你说的这些我都明白，但你能具体说一下，举个例子也行。为什么要把细胞阻滞于G0/G1期？这样做的目的到底是什么呢？
  我看到几个实验：1、大鼠原代培养的神经元缺氧复氧模型，观察药物保护作用时的MTT
  2、小鼠心肌细胞TNF损伤模型,观察药物保护作用的MTT
  3、抗癌药物筛选时做MTT
  这些实验都用了去血清培养，这是为什么?您能给解释一下么？
  
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  1.同步化的目的是不同药物刺激组从同一个起点开始——对比有针对性
  2.抗癌药物筛选一般做同步化——不同药物从同一起点出发，对比药物对细胞的影响
  3.缺氧复氧可以不用做同步化——药物的浓度梯度足以区分不同组之间的差异了；
  4.细胞增殖，细胞毒性实验——一般不错，除非作用药物是针对周期影响的；
  5.药物对细胞某一因子的影响——做同步化；一般这种实验药物浓度较低；
  
  总之，个人建议——不知道结果会是什么样的情况下，相关文献没有报道，建议同步化；
  让不同组能够同一个起点开始；

• ha111 (2012-3-20 11:12:40)

  
  事实上 不论用MTT CCK8 BrdU EdU方法检测细胞增殖都都需要细胞同步化
  
  同步化的目的是先阻滞在同一时期 以便多组对比