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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2012-9-12 13:17 作者: baidukk 来源: 分析测试百科网
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最新回复
2541 (2012-9-12 13:17:28)
复苏细胞后第二天应该换液,以彻底清除残留的DMSO等对细胞有害的因素;
另外,从你操作来看,你三四天后,没有换液或传代,那么细胞长的太密了就会脱落.建议你2-3天换液,并观察细胞生长情况,如长满了就需要传代了,一般周期2-天.
fklo83 (2012-9-12 13:17:53)
同意
另外,如果你的细胞对DMSO敏感,建议复苏当时就离心以去除DMSO,这样细胞状态会好的
vcve (2012-9-12 13:18:17)
u234 (2012-9-12 13:18:38)
复苏当时离心除去上清,换入新的培养基培养一天后大部分细胞均贴壁,这时候应该及时换液以出去残留的dmso,这样有利于细胞恢复。
kewanqi2011 (2012-9-12 13:19:08)
复苏时是否离心主要看个人的习惯问题,但是复苏后的24小时之内一定要换液以去除残留的DMSO,在37℃条件下它对细胞的毒性是很大的。一般12小时以内细胞的贴壁都比较好了,这个时候就应该赶紧换液了。:)
whitesheep (2012-9-12 13:19:32)
我们实验室作过很多的细胞培养工作,也建过很多的细胞系,我们一般都是在复苏完毕后就马上作离心去掉DMSO,此物对细胞的影响很大。刚复苏的细胞非常脆弱,所以在操作时务必小心,复苏完后过一个周左右的时间再换液,频繁换液尤其是在细胞密度很小时,对细胞没有好处,因为media里面有细胞分泌的因子等有助于其生长的物质。
baidukk (2012-9-12 13:20:01)
我在复苏时一般离心一次,去除上清,然后把细胞重悬,转入培养瓶内,再填加足够培养液,我想即使残留DMSO,应该也已经被稀释了吧,还会有毒害作用吗
tangxin_80 (2012-9-12 13:20:26)
gemei0115 (2012-9-12 13:20:43)
个人认为应该复苏当时就离心以去除DMSO否则对细胞影响很大,以前试过复苏的时候不离心直接转入培养瓶里,结果第二天准备换液时发现细胞根本就不贴壁!
huifeng0516 (2012-9-12 13:21:01)
我复苏细胞一般不离心直接加入,这时候培养基多一些,使DMSO稀释到最低限度,一般对细胞影响不是很大。
ero11 (2012-9-12 13:21:19)
不过如果细胞不是很好贴壁的话,建议最好严格按照细胞复苏的步骤来,按要求是应该在复苏时离心去除DMSO,次日换液。
ROSE李 (2012-9-12 13:21:35)
如果复苏时采用的是离心方法,即离心去除DMSO,那么第二天可以不换液。如果采用的是稀释的方法,即加入8-9ml培养基以稀释DMSO来消除影响的话,第二天早上一定要还液,以便彻底去除残留的DMSO,否则会对细胞生长造成不利影响。
15625878206 (2022-12-16 22:59:50)
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15625878206 (2022-12-16 22:59:51)
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【求助】细胞复苏后第二天要立即换液吗