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分享：反相液相色谱中流动相pH的确定

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2010-3-15 11:12    作者: maomi530    来源: 分析测试百科网

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反相高效液相色谱缓冲体系PH的选定

　　反相高效液相色谱中缓冲体系PH值的选择在反相高效液相色谱分析中，选择正确的缓冲液PH值，对可离解的化合物分析的重现性十分重要，不恰当的PH值可能导致不对称峰，宽峰，分裂峰或肩峰，而尖锐的，对称的峰是定量分析中获得低的检测限以，两次分析之间较低的相对标准偏差(RSD)和保留时间的高重现性的前提。我们将讨论在使用缓冲液时如何选择缓冲液的PH值，以及如何选择正确的缓冲体系。

　　什么时候需要缓冲溶液?

　　在反相液相色谱分析中，流动相的PH值一般在2.5-7之间，当被分析物在反相条件下可离解，或样品的PH值在2.5-7之外时，就需要缓冲液。在反相条件下可离解的化合物一般都有氨基和羧基，他们的Pka在1-11之间，选择正确的缓冲液PH值可保证可离解的官能团以一种形式存在，离子形式或中性化合物的形式。如果样品的PH值对柱子有伤害，则缓冲溶液可使其变温和从而减小其危害。

　　如何选择缓冲液PH值

　　在选择缓冲液PH值之前，应先了解被分析物的Pka，高于或低于Pka两个PH值单位的，有助于获得好的、尖锐的峰，从HH公式：PH=Pka+log([A-]/[A])得知，溶液 PH值高于或低于Pka两个单位，化合物中99%以一种形式存在，而一种形式存在的化合物才能获得好的尖锐的峰。

　　如果选择不到合适的，样品的pKa与流动相的pH非常接近，那么流动相pH微小的变化，都会引起样品保留时间较大的变动。

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最新回复

  • 感悟人生 (2010-3-15 11:20:12)

    技术含量较高，有实用，非常感谢！

  • nancy7752 (2010-3-15 11:28:06)

    谢谢LZ
    文章非常有价值  

  • Roger01ws (2010-3-15 11:31:28)

    感谢，楼主提供了这么有价值的文章

  • ccf335 (2010-3-15 11:32:16)

    挺好的文献,有一定的启发

  • gitde (2010-3-15 11:34:03)

    谢谢
    对我非常有用

  • haohaorenjia (2010-3-15 11:35:46)

    说的很有道理。很想全都看完，哈哈！！

  • q_r_epcnge (2010-3-15 11:42:51)

    谢谢楼主，发布的资料很实用

  • kcuw589 (2010-3-15 11:44:29)

    又长知识了,谢谢~~

  • ngoir (2010-3-15 13:43:59)

    长见识了，谢谢！顶

  • yyid (2010-3-15 14:00:07)

    好资料啊，真有用！

  • ghl0415 (2010-3-28 20:26:45)

    反相液相色谱中流动相pH的确定

  • zzj (2010-3-28 21:09:52)

    dddddddddddddddddd

  • long2tong1 (2010-3-29 01:53:10)

    我正需要学习这方面的东东，谢谢了。

  • xxjc2007 (2010-3-31 20:33:50)

    先看看

  • pthqufgw (2010-4-01 10:51:02)

    很想知道PH的影响

  • ylylttt (2010-4-01 14:34:19)

    还有一点 当有机溶剂和水 作流动相时,调PH 一定注意操作的连续性

    先调水相PH再混合 这种为最佳

  • ren (2010-5-22 09:38:46)

    谢谢楼主

  • wy82 (2010-6-23 22:57:29)

  • 维拉2010 (2010-7-07 11:23:05)

    很有用 非常感谢

  • ylylttt (2010-7-08 08:52:18)

    bucuo  我想知道 怎么样得到某个物质的pka 呢
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