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【求助】western中怎样才能把条带跑得细一点?
样品是组织蛋白,上样量20ul(蛋白40ug),每次跑出来条带都散开的【求助】western中怎样才能把条带跑得细一点?
用的是4%的浓缩胶,跑浓缩胶时看到溴酚蓝压的很细,跑到分离胶就会变粗好多,尝试过增加浓缩胶的长度及延长浓缩胶的凝固时间效果都不好,请教高手如何解决?谢谢。
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【求助】western中怎样才能把条带跑得细一点?
字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-6-17 11:22 作者: abc816 来源: 分析测试百科网
最新回复
vcve (2014-6-17 11:22:58)
曝光后片子上条带很粗吗?蛋白有多大?如果分离胶浓度高,跑的时候溴酚兰是会扩散的比较开。
u234 (2014-6-17 11:23:34)
我的也是
在浓缩胶跑得好好的
分离胶就有点散了
tuuu2 (2014-6-17 11:24:59)
eve_49 (2014-6-17 11:27:41)
跟电泳槽有点关系,用BIO-RAID的随便跑,条带都很漂亮
zsxan1990 (2014-6-17 11:28:02)
注意电压了吗
duoduo (2014-6-17 11:28:33)
glass (2014-6-17 11:28:56)
abc816 (2014-6-17 11:29:33)
电压80和100V
转膜1mA/cm2
目标蛋白40-50kD
vcve (2014-6-17 11:30:08)
xue258 (2014-6-17 11:30:28)
会不会跟loading buffer有关系啊?
finger (2014-6-17 11:30:58)
我也出过类似的情况,我开始跑得很好,最近也是跑胶过程中溴酚蓝弥散,我估计可能是上样缓冲液的问题,不过并不影响考马染色和转印的结果。
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