查看完整版本请点击这里:
【求助】WB图片分析
【求助】WB图片分析
各位战友,帮我分心一下我作的WB的图片。5%脱脂奶粉封闭2小时,一抗(santa cruz ;1:100)2 小时,二抗1:10000 90分钟后显影,发现每个涌道都显影,没有明显的特异条带的出现。请问涌道出现这种情况的显影是什么原因呢?上次用1:1000的二抗作发现膜上均匀弥漫荧光,这次降低2抗浓度弥漫荧光不见了却出现现在这种情况。请各位给指点指点,先谢谢了!
查看完整版本请点击这里:
【求助】WB图片分析
【求助】WB图片分析
57749203.snap.jpg
最新回复
flower@@ (2014-6-17 15:09:00)
还有FILM上的黑点是什么东西呢
hold住 (2014-6-17 15:09:37)
怀疑抗体有问题
flower@@ (2014-6-17 15:10:06)
fsdd817 (2014-6-17 15:10:41)
不过, santa cruz 的抗体应该是不错的. 换一下抗体浓度试一试
ladyhuahua (2014-6-17 15:11:03)
我没有碰倒过这种现象
感觉你的封闭时间有问题,建议增加封闭时间,4小时以上
还有你的蛋白是否有问题,建议你留一半胶染一下
个人意见,希望对你有帮助
good luck!!!!!
flower@@ (2014-6-17 15:12:55)
有人认为santa的抗体不稳定,没有办法,今天硬着头皮用博士德的试了一下,白版一张,啥也没有,郁闷。各位前辈请多多指点。
xyw5 (2014-6-17 15:13:17)
flower@@ (2014-6-17 15:13:37)
抗体是今年春节刚订回来的,作面议组画很好, 您认为还会是其他什么情况呢?我们实验室几个用一抗是羊抗的实验都不怎么好,您认为还会是什么原因呢?
taoshengyijiu (2014-6-17 15:13:57)
flower@@ (2014-6-17 15:14:35)
大家感觉用santa 的抗体作WB效果怎样,我们实验室三个人用一抗是羊抗的作都不怎么样。
greenbee (2014-6-17 15:15:18)
大家对santa 抗体的评价都不是很好,我建议你将一抗结合时间延长,可以四度过夜,二抗的建议效价是多少?你可以用1:2000-3000试试,如果用的是多克隆抗体可以延长封闭时间
【求助】WB图片分析