【求助】跑双向第二向时,电压程序是怎样的呢?


我用的是Bio-rad公司的二向系统,采用恒流。
有的战友说刚开始的电压与跑出的结果有关,我刚开始都是20V的样子,结果不大好。请问电压或电流与蛋白质进入PAGE胶有什么影响呢?

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最新回复

  • mimili_901 (2014-6-17 15:26:25)

    我们二向的条件如下:
    15℃,衡功率的条件下进行,先以每胶2.5W电泳30 min,而后每胶17 W电泳约5 h,直至溴酚蓝指示线到达凝胶底边处。
    其实,这个二向电泳和western 电泳是一样的。
  • qhyu (2014-6-17 15:28:06)


    请问,你们用的 是哪个公司的仪器呢?
  • kent (2014-6-17 15:28:24)


    我用的是bio-rad的双向电泳系统,我使用的是恒压系统,在17厘米胶条的时候使用75v10-15分钟(以溴分蓝走过胶条进入 sds-page为止),之后使用300v或350v即可.
  • qhyu (2014-6-17 15:28:44)


    bio-rad公司不是推荐恒流吗???
    你用恒压跑出来的效果怎么样呢?跑完一张胶需要多少时间呢?
  • duoduo (2014-6-17 15:29:15)

    大胶板大概需要2-3个小时!效果不错!我们实验室一直用的恒压跑的第二向!不过应该注意及时冷却胶板!其实我觉得这个恒压恒流到是其次,主要的还是电压或者是电流大小合适就行!
  • greenbee (2014-6-17 15:29:32)


    刚开始的电流应该要小些才好吧,但电流不能太小防止扩散和逆流,等看指示剂完全进入浓缩胶并形成一条线后再加大电压(稳压)跑.