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【求助】我做Western中的2个问题

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-6-17 16:03    作者: applebook=213    来源: 分析测试百科网

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【求助】我做Western中的2个问题

1，我孵了一抗以后， 在大约目的带的位置，膜变透明了，是什么原因啊？二抗以后更明显，就像煮熟了一样
2，X光胶片和有荧光的的膜一起放在盒子里就曝光了， 原理是什么呢？难道有X光，还是加了ECL发光底物索发出的荧光就是X射线？？Question
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  • avi317 (2014-6-17 16:03:35)


    1.请问你用的是不是PVDF瞙？
    2.ECL发光可以使X光片感光。

  • applebook=213 (2014-6-17 16:04:06)


    1是啊是啊， 就是pvdf膜， 是正常的么？
    2哦，这样啊，明了 ，谢谢！那用一般的胶片行不行呢？

  • fsdd817 (2014-6-17 16:04:26)

    唉？为什么啊！？我用PVDF膜，立春红染色后看见的蛋白带居然也是透明的！

  • nn255 (2014-6-17 16:04:46)


    你转膜以后
    干燥充分了吗

  • applebook=213 (2014-6-17 16:05:11)


    1.我没用过PVDF瞙 ，但是我看别人用PVDF瞙做过，他们做的比较成功，我看他们的瞙有那种现象，PVDF瞙要用甲醇处理的。
    2.我用的是医用的X光胶片，胶片不仅对X光可以感光而且可见光也可以感光的，如果你去过临床的放射科你就可以发现，他们的胶片都是蔽光的，胶片对红光不敏感，因此洗片的时候暗房里用的是红灯。胶片对绿光和蓝光敏感，如果你做发光的时候 比较强的话，可以看到条带是绿色荧光，因此容易感光就是很正常的事情了。

  • zhenxin (2014-6-17 16:05:29)


    如果要用立春红染色，要把膜用甲醇20％处理两分中，然后用丽春红 染色 就出带了 。

  • applebook=213 (2014-6-17 16:05:56)


    转完膜我先用甲醇处理，然后自然干燥了的。
    请问，你看见的人们在膜透明以后，做出来了吗？还是你的意思是说，在看见透明以后还要用甲醇处理？
    我是转完膜后先用甲醇处理，然后自然干燥，然后孵一抗就看见透明了，然后PBS洗，然后孵二抗透明常常更明显了，然后洗，然后曝光显影但都可以看见透明的带呢

  • tie8 (2014-6-17 16:06:14)


    她们在瞙透明的时候 ，可以做的出，不过不是很透明，感觉是半透明的。不过她们好像是在转瞙前 用甲醇处理吧，你看一下PVDF瞙的说明书，她们说是按照说明书做的。
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