【求助】全波长扫描的问题??

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• yes4 (2014-6-18 10:23:29)

  
  我扫了另外几个样品,都是在200附近出现许多奇怪的峰
  本来这些样品应该在260附近最大吸收的,
  这几个样品的图

  
  43993712.gif

• fei1226com (2014-6-18 10:24:53)

  
  其实通常意义上说的蛋白在280nm有吸收峰是一个均衡的值，大多数蛋白在这个波长有吸收峰，并不是说在其他波长就没有吸收峰了
  象多肽，很多都在220。235nm这样的波长有吸收，而在280却没有吸收的。
  所以好的层析检测仪和工作站是多波长同时监测的

• yes4 (2014-6-18 10:25:15)

  
  呵呵,谢谢
  我也知道蛋白不是只有280吸收,不过我以为常用来做标准的牛血清蛋白是的?
  关键的问题是牛血清蛋白还有我的那几个分子量4万多的蛋白都在200附近出现许多奇怪的峰.
  1,这正常吗?
  2,是因为仪器问题?
  3,我的蛋白为何在260-280附近都没有吸收峰?小峰都没有
  

• xue258 (2014-6-18 10:25:37)

  你用的比色皿是石英的吗？进口国产的？
  很多国产的比色皿虽然说是石英的，但是实际上是很粗糙的石英，在290nm以下有很多杂峰，我们现在实验室就是这样的。但是我读研究生时候用的比色皿是进口的，一对大概2000块钱左右，做杯空白全波长扫描就没有杂峰。我做过牛血清白蛋白的波谱，在280nm左右有吸收峰

• fei1226com (2014-6-18 10:26:06)

  呵呵,谢谢
  我也知道蛋白不是只有280吸收,不过我以为常用来做标准的牛血清蛋白是的?
  关键的问题是牛血清蛋白还有我的那几个分子量4万多的蛋白都在200附近出现许多奇怪的峰.
  1,这正常吗?
  2,是因为仪器问题?
  3,我的蛋白为何在260-280附近都没有吸收峰?小峰都没有
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  既然知道其他波长下也有吸收峰，那不是很明了了么？
  还可以看峰型，一般正常的峰是柔和的曲线，如果是突上突下，还有可能是检测池里有异物或者气泡。
  280有吸收峰，按理如果用275也应该有吸收峰的，如果在275没有吸收，那可能是机器的问题了

• yes4 (2014-6-18 10:27:11)

  
  谢谢
  异物或者气泡应该不会有的
  明天扫描高纯水看看,
  恐怖,担心硬件的问题

• kuaizige (2014-6-18 10:27:50)

  
  是测试的机子系统软件不稳定,参考说明书调一下软件设置应该就可以了!