【求助】请问我跑蛋白电泳为什么条带拉不开啊？！

最新回复

• lixi559 (2014-6-18 10:29:39)

  有没有marker？marker跑得怎么样？最好有个图看看

• PINK (2014-6-18 10:30:46)

  
  电泳系统一般无关的，估计还是电泳buffer或者凝胶配制的问题，你仔细检查一下相关buffer的配方，包括各种试剂的加样量，虽然你重新配制试剂了，但是如果你的配方有误，结果还是一样的。

• wmp1234 (2014-6-18 10:31:04)

  
  我们实验室也一直在用BIO-RAD的电泳系统，没有什么问题，可能还是电泳缓冲液的问题吧

• 33号 (2014-6-18 10:31:22)

  
  最小分子量是26KD，12％分离胶好象不合适。用10％的。另外把凝胶贮液以及Buffer重新配制一下。

• ritou1985 (2014-6-18 10:33:09)

  
  你可以到cuturl('http://www.dxy.cn/bbs/post/view?bid=67&id=6110478&sty=1&tpg=1&age=0')看看！

• 131415 (2014-6-18 10:33:36)

  
  BIO-RAD的电泳系统是非常好用的啊
  我建议你把胶的浓度降低到10%

• junjie05 (2014-6-18 10:34:11)

  感谢各位的帮助，我们把所有的试剂都配了新的，可结果还是这样，marker的条带没有拉开，全都挤到上方，真搞不懂是为什么了。

• abc816 (2014-6-18 10:34:36)

  
  你用的tris-hcl的PH值是不是过高了
  应该把PH值校准
  还有你的sds是不是还好用?

• yayya (2014-6-18 10:34:58)

  
  个人感觉是胶浓度太大了，换小点试试！

• windy+++ (2014-6-18 10:35:30)

  
  很明显配方有误或不标准，或试剂质量是否发生变化，建议检查包括Buffer，胶的配方，及各试剂。

• zwsyrt (2014-6-18 10:35:59)

  
  做胶的时候那个胶条拿掉没有，我以前因为这个一直跑不开
  还有就是电泳液量够不够

• plaa (2014-6-18 10:36:22)

  
  应该 Tris-Hcl的PH太高了，我们前一段也出现了这样的问题

• u234 (2014-6-18 10:36:42)

  
  这个问题我遇到过,应该是Tris的pH不对!
  楼主可用2台pH计校准.

• u234 (2014-6-18 10:36:59)

  
  Tris的pH不对.导致溴芬兰跑得过快

• wmp1234 (2014-6-18 10:37:24)

  
  先降低胶的浓度，用7.5%的试一下，如果不行，就像楼上说的校准pH，或者样品上样前离心一下，或者电泳前跑一下预电泳，看电流大不大，我作的少，只能提供点建议。

• wmp1234 (2014-6-18 10:37:50)

  我的经验是，这个问题跟胶浓度一点关系都没有。我用15%的胶也能把40KDa的条带分开。我们实验室用的所有的溶液，均按照《蛋白质技术手册》汪家政，范明主编的配制，p78-82。检查一下你的loading buffer配制是否有问题，你的Marker是否用自己的loading buffer配制的。很可能是loading buffer 的问题，对照技术手册，看一看自己的溶液是否有错？另外，电泳时，电泳缓冲液一定要没过胶面