首页
行业热点
政策法规
产品中心
低碳
前沿Lab
下载中心
群组
群组论坛
博客
搜索
帮助
分析百问
经验共享
书刊
展会培训
新手成长区
推广与广告
分析生活
您的位置:
分析测试百科网
>>
论坛
>>
经验共享
>>
查看帖子
最新更新主题
示波器 WaveMaster 845Zi-A 现金回收
Lecroy SDA813Zi 回收 SDA813Zi-A
DSA72004C 混合信号示波器 收购
Lecroy SDA830Zi-A示波器 回收
Lecroy SDA825Zi-A 现金回收
DPO3012示波器 DPO3034 优惠出售
DL9240L 出售 DL9140L 示波器
DPO3014 优惠供应 MSO3034 示波器
DPO5104 示波器 优惠供应 DPO5054
美国泰克 TPS2012B 优惠供应
【求助】怎么去除菌体破碎后上清的颜色
字体:
小
中
大
|
打印
发表于: 2014-6-18 16:43 作者: docsy 来源: 分析测试百科网
查看完整版本请点击这里:
【求助】怎么去除菌体破碎后上清的颜色
各位高手,小弟遇到一个棘手的问题。菌体破碎后的上清通过阳离子交换树脂后,呈淡黄色,请问用什么方法可以将其去除。
查看完整版本请点击这里:
【求助】怎么去除菌体破碎后上清的颜色
我也来说两句
查看全部回复
最新回复
IAM007
(2014-6-18 16:44:05)
上样前呈淡黄色吗?
docsy
(2014-6-18 16:44:29)
对,上样前是亮黄色,通过阳离子树脂可以使颜色变淡,但是洗脱液还是呈淡淡的黄绿色。浓缩结晶后,有黄色的东西。不知道怎么处理。请princessann及大家帮忙。
wmp1234
(2014-6-18 16:44:49)
为什么要祛除这些颜色呢,难道它对你的目的蛋白检测有什么显著的影响吗,没有的话可以不去管他,我认为。
glass
(2014-6-18 16:45:06)
根据你的描述觉得是细胞破碎时可能破碎的不够彻底引起的。可以适当延长破碎时间。或者离心后再加一步过滤步骤。
yjf1026
(2014-6-18 16:45:26)
你的宿主是大肠杆菌还是酵母呢?
不妨样品在纯化之前或之后做一下透析或超滤,进行缓冲液置换,可以去除一部分有色杂质
通过离子交换必然会吸附色素,也和蛋白一起洗脱下来。工业上脱色方法一般是活性炭的。
ladyhuahua
(2014-6-18 16:45:42)
是啊,这颜色对纯化目的蛋白又没有什么影响,为什么要除去它呢?
lxh031
(2014-6-18 16:46:03)
不知道你的菌体是什么菌体?至少说明你的色素还没有除好,应该考虑在过几个例子层析柱,就可以了
docsy
(2014-6-18 16:46:25)
谢谢各位。我要的是短肽,要求脱色干净。我用的酵母菌,破碎后,上清过离子交换柱。洗脱液有黄绿色。发酵上清先已经离心去除了,色素是由于破细胞引起的,是胞内的未知的东西。请大家帮帮忙。
qqq111
(2014-6-18 16:46:44)
酵母表达会形成黄色色素和绿色色素,一般分子量在5K一下不等,你的是胞内表达,色素会少很多,另外培养基残留、细胞代谢物也会存在有色物质。用超滤是个比较合适的方法,纯化前、纯化后使用都可以,可以采用膜包或超滤离心管。关键是选择超滤膜的截留范围。一般比你的目标蛋白小1/3的孔径的膜,可以保证较大的收率,所以如果你的蛋白分子量接近色素的话,超滤就不合适了。胞内表达的话,可以采用离子交换,阴离子交换会吸附较多的色素。
查看全部回复
我也来说两句
查看完整回复请点击这里:
【求助】怎么去除菌体破碎后上清的颜色
最新回复
IAM007 (2014-6-18 16:44:05)
上样前呈淡黄色吗?
docsy (2014-6-18 16:44:29)
wmp1234 (2014-6-18 16:44:49)
为什么要祛除这些颜色呢,难道它对你的目的蛋白检测有什么显著的影响吗,没有的话可以不去管他,我认为。
glass (2014-6-18 16:45:06)
根据你的描述觉得是细胞破碎时可能破碎的不够彻底引起的。可以适当延长破碎时间。或者离心后再加一步过滤步骤。
yjf1026 (2014-6-18 16:45:26)
你的宿主是大肠杆菌还是酵母呢?
不妨样品在纯化之前或之后做一下透析或超滤,进行缓冲液置换,可以去除一部分有色杂质
通过离子交换必然会吸附色素,也和蛋白一起洗脱下来。工业上脱色方法一般是活性炭的。
ladyhuahua (2014-6-18 16:45:42)
是啊,这颜色对纯化目的蛋白又没有什么影响,为什么要除去它呢?
lxh031 (2014-6-18 16:46:03)
不知道你的菌体是什么菌体?至少说明你的色素还没有除好,应该考虑在过几个例子层析柱,就可以了
docsy (2014-6-18 16:46:25)
谢谢各位。我要的是短肽,要求脱色干净。我用的酵母菌,破碎后,上清过离子交换柱。洗脱液有黄绿色。发酵上清先已经离心去除了,色素是由于破细胞引起的,是胞内的未知的东西。请大家帮帮忙。
qqq111 (2014-6-18 16:46:44)
【求助】怎么去除菌体破碎后上清的颜色