【求助】SDSPAGE电泳图辨率很差是什么原因？

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• plaa (2014-6-19 13:23:07)

  胶浓度多少？若低于10%建议试试高浓度，如12-15%。
  也可能是温度，冷凝系统怎样？天气开始热了，冷凝若使用自来水需要开大点了。
  制胶分离胶部分分界面平不平？看你的图好像分界面就不平，可以试试加完分离胶后用异丙醇封胶，用水封容易在两端稍微下陷。
  还有你跑的电压是多少？我用的Amersham的，浓缩胶60V，分离胶130v，效果不错的，你可以摸摸条件。
  还有样品，会否浓了？不过看你最左边一道是Marker吧？已经不好了，可能性不大。
  当然还会有许多影响因素，你给的资料不太全，建议先试试这几项，供参考。祝好运！

• coolcool (2014-6-19 13:23:44)

  胶浓度是12％，感觉胶比以前凝得快了，具体时间没有注意到。
  电泳要冷凝，还是做胶要冷凝？
  分离胶是平的了，可能拍照的时候倾斜了。
  我跑浓缩胶80v，分离胶120v，以前跑得很好的呀！
  样品也不浓，Marker都没有跑好，分辨率奇差！
  

• plaa (2014-6-19 13:24:08)

  
  跑电泳时一般都用循环水冷凝，若是用低温循环水浴一般问题不大，但使用自来水循环的话就会和天气有些关系了，可以试试放到冰上跑或干脆放到冷库里跑。
  还有现在用的loading buffer、Tris(pH6.8)等缓冲液是否pH不准了，主要就是靠这几个pH的不同来跑胶吗，若不准了也有可能会弥散。

• linlinstar (2014-6-19 13:24:25)

  
  page胶对温度要求很高
  天热的时候要开空调阿
  如果你的上样缓冲液用很长时间的话，建议从新配一下，分装，-80度保存

• 箭头儿 (2014-6-19 13:25:07)

  QUOTE:

  原帖由 plaa 于 2014-6-19 13:24 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  跑电泳时一般都用循环水冷凝，若是用低温循环水浴一般问题不大，但使用自来水循环的话就会和天气有些关系了，可以试试放到冰上跑或干脆放到冷库里跑。
  还有现在用的loading buffer、Tris(pH6.8)等缓冲液是否pH不准了，主要 ...

  比较赞同这个观点，以前也出现过这样的问题，后来发现所用缓冲液的pH值出了问题。

• PINK (2014-6-19 13:25:32)

  
  跑的不齐可能是浓缩胶太短，可适当加长浓缩胶。

• wmp1234 (2014-6-19 13:26:11)

  你一直做的很好，现在没有其他原因突然不好了，一般是你的液体出问题了，建议重新配置各种液体，包括制胶的和跑胶的！

• dior (2014-6-19 13:26:29)

  
  谢谢大家！
  我把所有的东西全部自己配制后，电泳正常了。