【求助】二维电泳中SDS－PAGE胶面不平

最新回复

• fei1226com (2014-6-21 09:16:02)

  
  建议:
  1) 贴壁缓慢加封胶液,同时,可适量减少AP浓度,减慢凝胶的聚合.
  2) 用水饱和的正丁醇封胶(或0.1%SDS 溶液封胶)
  试试看!应该管用!

• luoliqiong (2014-6-21 09:16:32)

  
  我按照楼上的意见又做了一次，改善了一些，但还是有点小波浪，是不是我板子有漏的缘故呀，望指教，谢谢！

• xyw5 (2014-6-21 09:16:56)

  
  现在一般用乙醇封胶。胶面不平可能是你灌胶时液面太高的原因，距离玻璃板上沿1~2mm试一下，压完乙醇不要动，静置。

• zhenxin (2014-6-21 09:17:17)

  最后灌胶时倾斜一些，放平后去离子水封。

• fei1226com (2014-6-21 09:17:35)

  
  一定要避免灌胶器漏胶,要不然,不仅胶面会不整齐,局部还会发生聚合不均匀的现象,跑出的胶好看不到哪里去.(特别在大通量灌胶时会显得更严重)
  另建议封胶液多加一些, 试过17cm 的胶,用1.5ml的封胶液比用1ml的效果好.

• wmp1234 (2014-6-21 09:17:54)

  
  缓慢
  缓慢最重要

• uaubc (2014-6-21 09:18:13)

  
  我一般用乙醇封，估计可能是模具的问题！

• abc816 (2014-6-21 09:18:31)

  
  我也用去离子水封的。感觉还好。你用的板子有问题吗？？
  做了几次都这样，应该是仪器的问题吧

• wmp1234 (2014-6-21 09:18:49)

  
  用水封肯定没问题
  如果你板子刷的干净的话
  慢慢封是不会不平的
  建议多加点TEMED加快凝胶速度

• one (2014-6-21 09:19:07)

  
  用去离子水封过，效果可以；但是用无水乙醇封感觉效果更好，压的平也可以排除气泡。灌胶的时候首先要保证你用的板子是配套的，封的时候不要从一处下去，要缓慢均匀的加在整块胶上。

• 3648755 (2014-6-21 09:19:24)

  我们都是用去离子水封的，挺好的，要缓慢加，另外是不你的玻璃板没洗干净啊？

• jrwyyplt (2014-6-21 09:19:40)

  
  建议采用20ml注射器平推

• hot_hot_hot (2014-6-21 09:19:55)

  
  什么都不用，你只需在加水封后，用手指轻弹几下就OK了

• bring (2014-6-21 09:20:12)

  
  应该是玻璃板不干净