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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2012-9-03 14:07 作者: 麦丽素1986 来源: 分析测试百科网
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最新回复
shenkunjie (2012-9-03 14:08:07)
麦丽素1986 (2012-9-03 14:08:31)
kulee (2012-9-03 14:08:57)
悬浮细胞在操作时,比贴壁细胞简单,不需要消化等步骤。
一般呈圆形,透光性好,发一张活性好的照片:
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kulee (2012-9-03 14:09:19)
再发一张活性差的照片,有些杂质,背景不干净:
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okhaha (2012-9-03 14:09:41)
悬浮细胞传代是不用消化,可有时需离心,离心过程一样可能会发生污染。处于对数期的悬浮细胞不是很圆,光亮,边缘比较锐利;而状态不好的细胞比较暗,很圆,细胞内颗粒比较多,有的有空泡。偶养的是CHO,别的悬浮细胞是不是这样偶就不清楚了。
okhaha (2012-9-03 14:10:11)
大家的悬浮细胞是用什么器皿来养的?养到多大规模呀,能达到多大密度?
yychen (2012-9-03 14:10:34)
CHO细胞是贴壁的呀,照你的意思好象是悬浮的呀,不对吧,我养的是贴壁的呀。我想知道你的照片是不是CHO的,要是的话,我觉得不可能
okhaha (2012-9-03 14:10:59)
CHO进行悬浮适应性培养后,就可以变成悬浮的了,用于表达目的蛋白,悬浮的比贴壁的优点多的多。
kulee (2012-9-03 14:11:20)
悬浮细胞在离心时,关键是要注意离心速度,我一般选择800转/分,5min。一般认为离心速度越大,对细胞的损伤越大。
此外就是要注意无菌操作了,关键是打开和关闭离心管之前要烧一下管口。
培养瓶没有特殊要求,不象贴壁细胞需要防脱处理。我们使用的100ml玻璃培养瓶,是家门祖传的家宝,呵呵(物美价廉)。
qumm1985 (2012-9-03 14:11:41)
wsll (2012-9-03 14:11:56)
我养的也是悬浮细胞。但离心速度达到2000转/分(rcf:3000g),10min,细胞仍然在离心管上贴壁不牢,吸去培养液时,细胞容易漂起来。细胞培养时间长了,背景特别不干净,就像上图所示的一样,而且碎片不容易除去。能帮我分析分析吗?
悬浮细胞可以用玻璃培养瓶或一次性塑料的都行!
麦丽素1986 (2012-9-03 14:12:20)
谢谢大家,给了我不少帮助。我得细胞是H22,小鼠肝癌,能产腹水。细胞在体外养的像第二张图片,看来活性不好啊,加把劲!!欢迎大家多进来交流
18332751696 (2020-8-27 09:40:27)
[讨论帖]养悬浮细胞的进来聊聊