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【求助】膜蛋白提取办法
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发表于: 2014-4-05 11:22 作者: 梦幻苹果 来源: 分析测试百科网
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【求助】膜蛋白提取办法
我做膜蛋白提取一段时间,结果硬是出不来,文献上说,500g离心5min,取上清,再100000g离心,弃上清,下层沉淀用裂解液再悬浮用来做膜蛋白用,但我始终没出结果,请问大家是何原因,我的是小肠组织。有没有更好的办法啊
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【求助】膜蛋白提取办法
我也来说两句
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最新回复
wu11998866
(2014-4-05 11:23:25)
是这样的,关于膜蛋白的提取,如果想单纯提取膜蛋白,而不是细胞总蛋白,用平常的RIPA是可以的,但是效果不理想,同时需要高速离心机,这种设备很多实验室是很难达到的
所以,最简单的是购买试剂盒,低速离心就OK,价格5,600百元吧,但是结果理想.
祝顺利
jiushikeshui371
(2014-4-05 11:23:48)
在酵母中表达人的膜蛋白,有什么好的提取方法吗?
panda王
(2014-4-05 11:25:17)
我也是做膜蛋白的提取,用的是南京凯基的膜蛋白提取试剂盒,但制备出来的样品跑蛋白电泳时什么也没有,不知道什么原因?
greenbee
(2014-4-05 11:25:57)
个人感觉膜蛋白提取Kit都有点out of style.不妨自己提取,我提取的膜蛋白的质量非常好,膜蛋白提取的关键是超速后membrane pellet的Na2CO3洗涤过程,要洗涤干净.
panda王
(2014-4-05 11:26:20)
自己怎么提取啊?能否告知一下提取程序?非常需要!谢谢了!
18270881747
(2017-8-16 18:39:07)
请问自己怎么提取呢?有protocol吗
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【求助】膜蛋白提取办法
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wu11998866 (2014-4-05 11:23:25)
是这样的,关于膜蛋白的提取,如果想单纯提取膜蛋白,而不是细胞总蛋白,用平常的RIPA是可以的,但是效果不理想,同时需要高速离心机,这种设备很多实验室是很难达到的
所以,最简单的是购买试剂盒,低速离心就OK,价格5,600百元吧,但是结果理想.
祝顺利
jiushikeshui371 (2014-4-05 11:23:48)
在酵母中表达人的膜蛋白,有什么好的提取方法吗?
panda王 (2014-4-05 11:25:17)
我也是做膜蛋白的提取,用的是南京凯基的膜蛋白提取试剂盒,但制备出来的样品跑蛋白电泳时什么也没有,不知道什么原因?
greenbee (2014-4-05 11:25:57)
个人感觉膜蛋白提取Kit都有点out of style.不妨自己提取,我提取的膜蛋白的质量非常好,膜蛋白提取的关键是超速后membrane pellet的Na2CO3洗涤过程,要洗涤干净.
panda王 (2014-4-05 11:26:20)
自己怎么提取啊?能否告知一下提取程序?非常需要!谢谢了!
18270881747 (2017-8-16 18:39:07)
【求助】膜蛋白提取办法