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我的SDS-page时好时坏,这是昨天天的胶。我用5%的浓缩胶,12%的分离胶。目的蛋白分子量17KD。5%的浓缩胶用80V,12%的分离胶160V的电压跑。到了胶下1/3处条带不清楚,溴酚蓝跑完后停止电泳,染色后就成了这样。今天又跑了一次,但是条带都很模糊,在没加样的泳道也被蓝然,蛋白maker条带也不清楚,请大家分析一下是什么原因。【求助】SDS-page
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-6-08 11:20 作者: docsy 来源: 分析测试百科网
最新回复
docsy (2014-6-08 11:20:47)
11212826.jpg
flower-201 (2014-6-08 11:21:08)
1. 未加样涌道蓝染估计是加样时漏到旁边涌道了,
2. 检查一下缓冲体系的PH值,主要是配胶的tris-HCL,电极缓冲液。同时要确定你的样品中盐离子的浓度不能过高。
nvdabing (2014-6-08 11:21:28)
建议降低一点电压。到140V即可。同意楼上,也要检查一下缓冲液的PH。
wmp1234 (2014-6-08 11:21:47)
缓冲液的PH应该在多少范围比较合适??谢谢!!
windy+++ (2014-6-08 11:22:13)
我觉得是你的胶还没有完全成形的原因。然后电压可能高了一点,产生的热量容易使样品扩散。
2541 (2014-6-08 11:22:38)
2、其他确保你的TRIS PH 值、缓冲液最好用新鲜的,增加上样量
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