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【求助】请教酶的解冻问题和甘油怎么准确吸出10微升
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请教各位,我辛苦的从细胞里提取出酶来,加等体积的甘油保护,置于-70度保存,现在的问题是用的时候怎么解冻才能最小限度的不让酶失活?还有我的实验要求能准确的吸10微升酶出来,但甘油太粘了,用加样枪怎么也吸不出来,所以,还请各位多多指点,不盛感激。
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最新回复
mybioon (2014-6-09 21:30:42)
你要吸取10微升酶,那就要吸取20微升的混合液,注意要混匀,用枪吸不出来不应该啊,即使是纯的甘油也能吸出来的,要缓慢的吸取和打出。
taoshengyijiu (2014-6-09 21:49:46)
谢谢两位,关于解冻我老板说让我在室温放一会,再拿到37度里水浴加热,我今天还被老板骂说这么简单的事情也不知道,真的就是这样做的么?酶的活性没有影响么?甘油我老板也让我在37度里温一下再吸。具体我还没做的不知道结果怎么样。还有顺便问一下,提取蛋白甘油需要消毒么?我是高压蒸汽灭菌的,也不知道是不是这个原因,甘油粘度增大呢?多多指点啊!
milkdog (2014-6-09 21:50:08)
进行酶的提取及其一系列操作不都是要求在4度下进行么,一下子直接从-70度拿到室温放一会,再拿到37度里水浴加热,酶活性难道不受影响吗?疑惑中。。。。
taoshengyijiu (2014-6-09 21:50:31)
ha111 (2014-6-09 21:51:39)
milkdog (2014-6-09 21:52:05)
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什么是二档吸取,一挡打出?
taoshengyijiu (2014-6-09 21:52:52)
【求助】请教酶的解冻问题和甘油怎么准确吸出10微升