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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-6-09 22:09 作者: HPLC使者 来源: 分析测试百科网
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原帖由 HPLC使者 于 2014-6-9 22:10 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '') 可我也是按照这样的步骤做的啊,就是做不出来,真拿它没办法。不过我用的是小鼠单克隆抗体IgG,不知道这样有没有关系呢?
最新回复
XYZQ (2014-6-09 22:10:11)
vcve (2014-6-09 22:10:34)
HPLC使者 (2014-6-09 22:10:52)
可我也是按照这样的步骤做的啊,就是做不出来,真拿它没办法。不过我用的是小鼠单克隆抗体IgG,不知道这样有没有关系呢?
XYZQ (2014-6-09 22:11:22)
提取肿瘤组织及细胞蛋白,定量后添加上样缓冲液,100℃沸水中煮5分钟,经40mA恒流SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,在冰浴条件下100V恒压1小时转移至PVDF膜上,5%脱脂奶粉封闭1小时,羊抗人多克隆抗体4℃条件下过夜,1×TBST洗脱后用二抗室温下慢摇1小时,再利用ECL化学发光法显影。
XYZQ (2014-6-09 22:11:40)
QUOTE:
没有关系,我的结果也没出来,建议找厂家HPLC使者 (2014-6-09 22:12:36)
听说上样量要达到100-150微克才能显出条带,我想是不是我们加的量都不够啊?
XYZQ (2014-6-09 22:12:55)
【求助】请问有没有谁做过VEGF啊?