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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-6-14 15:51 作者: niangao1980 来源: 分析测试百科网
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最新回复
niangao1980 (2014-6-14 15:51:29)
131415 (2014-6-14 15:51:47)
1,封闭O/N,4C;
2,最好选用单抗,一抗按说明书最好做低中高梯度;
3,转膜最好用湿转,冰浴。
zsxan1990 (2014-6-14 15:52:07)
条带清晰主要取决于电泳凝胶上的条带是否清晰.
背景深还有可能是显时间较长或洗涤不够充分.
niangao1980 (2014-6-14 15:52:30)
谢谢楼上二位的帮助。
转膜后用丽春红预染,条带还比较清晰,一抗说明书是1:100~1:1000,起始浓度1:200,我也试过1:800,1:1000,结果不理想。
显色时间是比较长,因为条带总不是很清楚,所以延长了显色 时间。洗涤是TBST 5min, 四次; TBS 5min 二次。
实验不知道怎样往下作了,郁闷啊!还有哪些高见?
xue258 (2014-6-14 15:52:51)
niangao1980 (2014-6-14 15:53:13)
niangao1980 (2014-6-14 15:53:57)
这次的结果还不如上一次,简直就要崩溃了。我做的是膜蛋白,是不是样品有问题?我用的是碧云天的P0013 Western及IP细胞裂解液 提的蛋白,它的说明书上没有明确说明是否可以用来提取膜蛋白,有知道的朋友快帮帮我。谢谢先!
zwsyrt (2014-6-14 15:54:14)
同意楼上的意见,试试压片的方法,我也遇到过这样的问题
【求助】怎样能使条带清晰?