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【求助】请教获得 AP-1 EMSA 阳性结果的一些问题

字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-6-14 15:58    作者: lyxsqs    来源: 分析测试百科网

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【求助】请教获得 AP-1 EMSA 阳性结果的一些问题
大侠高手们：
有两个问题想请教大家,
1. 用什么药品处理那种细胞能得到AP-1的EMSA实验阳性结果！！！ 急急急！！！ 请各位老师大侠高手指教！！！
2. 另外，我经常做非放射性EMSA实验，有时候我的一些样品加样后谈真都已经跑到底部了，可化学发光成像得时候结果显示要检测的蛋白－探针结合物去还在加样孔，没有跑出来，但相同得实验条件下其他的样品还是跑得不错，这种现象一年前我都碰到过了，只是偶尔出现，想在试验过程中得到解释，可是做了这么长时间，这么多实验，还是没有个合理的说法！
请各位老师，大侠，高手赐教，帮帮我分析一下可能的原因！
谢谢！！
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最新回复

  • mamamiya (2014-6-14 15:58:35)


    主要原因在加样孔，加样孔没有冲洗干净，导致蛋白滞留。

  • mamamiya (2014-6-14 15:58:57)


    要看您是什么细胞，如果是成纤维细胞，用TGF－b可以刺激获得阳性结果。

  • lyxsqs (2014-6-14 15:59:19)

    但是跑样品的其他的加样孔都是依次冲洗的，都没有卡在加样孔，而且这个样品卡过好几会

  • lyxsqs (2014-6-14 15:59:40)


    我手上有A549细胞，K562细胞，Meg01细胞，不知道大侠们知道怎样处理能得到这三种细胞的AP-1 EMSA阳性！！！ 我查了一些文献都没有提到！
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