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【求助】我用 western-blot 检测不到脑组织中的IL-1B,TNF-a
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我用 western-blot 检测脑组织中的IL-1B,TNF-a,两种抗体都是chemicon公司的,都是rabbit anti-rat,上样量已加至100ug,但怎么也做不出来。有人做这个的吗?分子量只有是十几,用PVDF转膜时间要缩短吗?我现在用的350mA,2小时。是不是还有其他原因啊?谢谢!
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最新回复
wawa (2014-6-14 16:30:49)
我也是,你的蛋白浓度是多少?怎么可能上那么高?
youreyes (2014-6-14 16:31:12)
我的蛋白浓度大约10 ug/ul,我上样时用10ul蛋白加10ul 2*loading bueffer
youreyes (2014-6-14 16:31:45)
你用多大浓度的胶啊?是不是细胞因子用western 很难检测出来啊?
misswu61 (2014-6-14 16:32:05)
我也用SANTA 的IL-1B的抗体也没有做出来。也很郁闷。
youreyes (2014-6-14 16:32:23)
misswu61 (2014-6-14 16:32:45)
我今天用santa的抗体将IL-1B做出来了(单抗1:200),蛋白浓度也不高,2点多。我觉得是你的抗体有问题。或者是别的问题。
youreyes (2014-6-14 16:33:06)
ii077345 (2014-6-14 16:33:25)
【求助】我用 western-blot 检测不到脑组织中的IL-1B,TNF-a