【求助】SDS-PAGE的样品处理中,如果不加热,...

最新回复

• duoduo (2014-6-17 16:54:45)

  
  能跑出条带，我是在加入loading buffer （不含巯基乙醇
  ）后，室温下放置30min，再上样电泳的。
  电泳后是整个蛋白的分子量。

• lxh031 (2014-6-17 16:55:06)

  
  没有问题。即使刚和loading buffer （不含巯基乙醇）混合，马上上样也没有问题。

• summerxx (2014-6-17 16:55:26)

  SDS电泳后，蛋白质失活了吧，没有活性了，只有重新使其重新复活才行，我说得对吗？

• moonlight45 (2014-6-17 16:56:31)

  想电泳后蛋白仍有活性所以样品不加热,也不加巯基乙醇
  电泳后到底是亚基还是整个蛋白的分子量?
  
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  要想有活性，要跑native gel, 不能加SDS。

• 831226 (2014-6-17 17:02:36)

  
  请问, 哪里有native gel的相关知识啊,谢谢!

• plaa (2014-6-17 17:03:07)

  
  加SDS可以的,也可以后活性的,复性一下,用2.5%的Triton100室温半小时即可.

• qhyu (2014-6-17 17:03:30)

  
  可以跑出带，但是条带不太好看啊，看你是什么用途了。

• jujuba (2014-6-17 17:05:19)

  如果你是想要活性,最好是用native-PAGE方法,这样跑出来的蛋白基本上能保持活性,加SDS变性后再复性效率很低,活性很难恢复过来.但native-PAGE的条件很难控制,控制的好跑出来的效果可以和SDS相媲美!