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【求助】表达蛋白纯化后SDS-PAGE为一条带,NativePAGE却跑出...
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诱导表达后,Ni柱纯化,SDS-PAGE电泳结果显示为一条带,17KD左右,但由于表达产物要做功能检测,NativePAGE却能跑出间距相等的三条甚至四条带,请问原因何在?
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fei1226com (2014-6-19 16:45:26)
不知道你的蛋白是否有半胱氨酸,可能通过二硫键形成复合体,
如果有,建议你跑一个非还原的SDS-PAGE看看。
至于这种复合体是否具有功能很难说,有必要的话过个分子筛把几个组分分开,分别测测活性。
小游abc (2014-6-19 16:46:58)
plaa (2014-6-19 16:47:15)
用HP-SEC跑一下看看
831226 (2014-6-19 16:48:20)
我曾经看到过这么一篇文章,主题是:
某些蛋白可能形成不同的二级结构或者三级结构,导致同种蛋白表现为不同的立体形状,比如:球型, 雪茄型等等.很显然,这两种形状在分子筛和 剃度离心中的表现是不一样.所以,你可以再这个方向上考虑,看看能不能解释你的疑问?
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