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【求助】请教一个SDS-PAGE灌胶问题
【求助】请教一个SDS-PAGE灌胶问题
刚开始做SDS-PAGE,经验不足,请各位大侠出手
我做的是不连续胶,垂直电泳,我遇到一个问题
我的分离胶和浓缩胶之间总是有一些小气泡。
请问有什么办法解决?
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字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-6-28 12:55 作者: deducte 来源: 分析测试百科网
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wood533 (2014-6-28 13:00:58)
有气泡会影响你跑胶时的电流,从而会影响你的蛋白条带的效果!及泳动速度!
所以一定要把气泡弄掉!
拿一个注射器,用针尖将气泡吸掉!
xyw5 (2014-6-28 13:02:11)
你有没有用水压胶啊,压过胶的话气泡一般不容易存在啊!
还有,你是不是在液体温度很低的情况下制胶的,要稍等液体升温后配胶,低温下的小气泡等温度一升高就会变大的。
ritou1985 (2014-6-28 13:02:44)
胶和胶之间一般不会有气泡的,可能是浓缩胶与玻璃板之间的气泡,这样就没关系的;还有可能是你的浓缩胶凝的太快了吧,使得气泡来不及上来就凝上了,可以试试降低AP含量;我知道的也就是这么多了,呵呵
deducte (2014-6-28 15:05:19)
我用水压了胶的。温度15度左右。
分离胶凝了后加了浓缩胶我仔细看了,确定没有气泡的
我是在拆除封边带、把玻璃板换方向的时候,松开契形板的时候发现两种胶之间出现一条小气泡组成的细分界线
大家再讨论讨论一下
tangxin_80 (2014-6-28 15:06:11)
会不会是胶和玻璃板之间的气泡阿?如果是,跑电泳时用缓冲液赶跑气泡就好了。
qhyu (2014-6-28 15:06:43)
哦,用的是国产设备吗?我用的biorad mini,几乎没有遇上过这样的问题。从你的叙述来看,估计是拆封条的时候外压增加导致的空气进入胶体间所致,是不是可以通过增加等候时间来解决问题,待胶凝后多等待一会,看看如何。
折叠引用
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我用水压了胶的。温度15度左右。
分离胶凝了后加了浓缩胶我仔细看了,确定没有气泡的
我是在拆除封边带、把玻璃板换方向的时候,松开契形板的时候发现两种胶之间出现一条小气泡组成的细分界线
大家再讨论讨论一下
summerxx (2014-6-28 15:07:09)
分离胶凝了后加了浓缩胶我仔细看了,确定没有气泡的
我是在拆除封边带、把玻璃板换方向的时候,松开契形板的时候发现两种胶之间出现一条小气泡组成的细分界线
从你的描述看,应该如四楼所言,是胶与玻璃板之间的气泡,影响不大不用理他
avi317 (2014-6-28 15:08:22)
我用水压了胶的。温度15度左右。
分离胶凝了后加了浓缩胶我仔细看了,确定没有气泡的
我是在拆除封边带、把玻璃板换方向的时候,松开契形板的时候发现两种胶之间出现一条小气泡组成的细分界线
大家再讨论讨论一下
根据你上面的描述,我估计你用的是六一的24D型。这种槽制胶后需要一个转向,去胶条的过程。注意操作1.如果不用其他工具,打开压板的时候另一只手的拇指和食指要稍用力捏住玻璃板,向外用力撕除胶条,再放置好玻璃板,压好压板,整个过程中手不松劲;2.找一个航空票夹,就是黑钢片的那种,先夹注玻璃板,然后同上操作,不用手指使劲了,此法更好。DOOD LUCK
各位有关电泳仪器使用的事可以问我,我知道一些。
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