您的位置: 分析测试百科网>> 论坛>> 经验共享>> 查看帖子
字体: 小 中 大 | 打印 发表于: 2014-7-05 17:28 作者: viviwang1987 来源: 分析测试百科网
53069227.gif
最新回复
wawa (2014-7-05 17:29:05)
我觉得可能有两方面原因:
1 样品处理问题,比方巯基乙醇挥发,sds不足等,建议重新配制上样液。
2 胶凝好以后,倒电泳液时在两块玻璃板间可能产生许多气泡,这会使电导不均匀,建议将产生的气泡用吸水纸洗掉。
3 配制的丙烯酰胺可能有一些沉淀或结晶,建议用滤纸过滤一下。
希望能对你有些帮助。
zhenxin (2014-7-05 17:29:21)
你把图贴上来看看.我觉得二向胶配制质量问题可能性更大一些.
viviwang1987 (2014-7-05 17:29:49)
我的电泳图,请参考.
53069227.gif
viviwang1987 (2014-7-05 17:30:16)
要是胶的问题,marker跑得还可以,没怎么弯曲啊?
fox_79 (2014-7-05 17:30:41)
这是“smile band"
可能原因:
1 跑电泳时,过热。建议将低电压
2 分离胶不平。 分离胶灌完后,吸水时不要碰到界面。
memory (2014-7-05 17:30:59)
Marker没有什么问题,如果你做过重复试验,一直是这样的结果,就应该排除胶的问题。我跑电泳也出现过跟你十分类似的问题,我做的是组织中的全蛋白,开始百思不得其解,后来换了一种裂解液就跑出直线来了,可能是裂解液中的成分对电泳有影响。希望对你有帮助:)
huifeng0516 (2014-7-05 17:31:16)
鲇鱼少爷 (2014-7-05 17:31:37)
简单补充一下:
1.根据您的marker来看,三条带跑的不错,但是您的marker就三条带吗?如果不是,您的胶还是存在一定的问题的:1)胶的浓度有点低,marker的分子量相对小的跑了出去。2)您的试剂特别是APS和TEMED是不是有过期的造成胶的浓度低。
2.您的胶凝的稍有不匀,因为胶凝匀,电流均匀,就不会造成局部不匀引起,泳道斜,也会出现条带弯曲波纹等现象。
3.电极缓冲液没太大问题,因为marker的三条带不错,样品盐浓度高发生扩散可能性最大,楼上站友已提到。
建议:对样品进行脱盐处理,在检查试剂没有过期的前提下增大胶的浓度。
【求助】为什么SDS-PAGE会出现"波纹"?