【求助】关于2-d的定量问题

最新回复

• standbyme (2014-7-05 22:09:13)

  
  我们测光吸收值时用酶标仪,比光度计测定要准确.

• bring (2014-7-05 22:09:31)

  
  用酶标仪测光密度值做出来的定量也会有偏差,酶标仪测定值前后重复就会有相当偏差.

• fei1226com (2014-7-05 22:09:49)

  
  但是如果同时存在几个要比较的样本，要求上样量一致的话，不测浓度还有什么可以估算的方法呢？

• tianmei001 (2014-7-05 22:10:17)

  
  我觉得还是要定量的

• nikonun (2014-7-05 22:11:06)

  
  我们测蛋白浓度也是用酶标仪,但蛋白倍比稀释后测得的浓度不成直线.

• taoshengyijiu (2014-7-05 22:12:49)

  
  如果是做蛋白质组学的比较分析，保证上样一样多就可以了，我是这样做的2D,具体上样量定的也不是很准确，有一个大约值就可以了

• 49888 (2014-7-05 22:13:10)

  
  作个标准曲线看看相关系数如何,对蛋白定量有一定参考意义的

• tudou85 (2014-7-05 22:13:36)

  
  最好还是做一下蛋白质定量
  因为你的提取总蛋白的时候，批次间的稳定性不一定会很好
  如果需要进行蛋白质组差异分析的话，还是需要总上样量大致相同的
  至于标准曲线不准确
  我认为可能是由于操作过程和测定方法产生
  不知道楼主用的什么试剂盒，我们用的是阿马西亚的定量试剂盒
  首先它是有保质期的，其次我觉得操作中比较重要的是那一步离心产生
  白色沉淀，注意离心管的摆放位置要一致，否则二次离心时可能将沉淀
  带入上清中被弃去，
  还有就是测量方法，我们比较是用分光光度计的，
  以前试着用酶标仪，发现效果不是很好，怀疑是光程太短了
  基本上我们做的标准曲线R2能有0.99。

• xevin (2014-7-05 22:14:12)

  我觉得既然我们可以通过内参的选择来驱除样品的上样量的误差,为什么还要引入蛋白上样前的定量测量,况且这种测量的结果的准确性我不敢恭维!!!!!
  是否可以抛弃着一步直接进行水化上样!