【求助】WESTERN BLOT 试剂问题

最新回复

• yjf1026 (2014-7-07 16:25:09)

  
  呵呵◎很长时间
  我用了半年都没问题

• uaubc (2014-7-07 16:25:30)

  30%的聚丙烯酰氨:丙烯酰胺和双丙烯酰胺在贮存过程中缓慢转变为丙烯酸和双丙烯酸，这一脱氨基反应是光催化或碱催化的，故应核实溶液的pH值不超过7.0。这一溶液置棕色瓶中贮存于室温(室温避光保存)，每隔几个月须重新配制。
  TRIS:高温灭菌后室温下保存,最好定期检查其PH值。不然会影响凝胶的PH值。
  10%SDS：室温下保存，一定不要放在冰箱里啊，会结晶的。如果室温比较低，有结晶的话，可以水浴溶解结晶后再用。个人认为只要该液体不浑浊，都是可以一直用的。

• ero11 (2014-7-07 16:25:57)

  
  呵呵,谢谢两位啊,可不知为什么,怎么我的样品一直不能很好的压缩呢,跑胶时样品带很宽

• jkobn (2014-7-07 16:26:13)

  可以从以下几方面考虑：
  1、电泳缓冲液使用时间过长，其离子强度增加，影响电泳。这个可能性比较大，我的电泳缓冲液用了3次左右就会出现条带弥散的情况。新配置的就很好。
  2、电压太低，使样品弥散。使电压维持在100-200V范围内进行电泳较适宜。
  3、没有选用合适浓度的凝胶，大分子的蛋白在小孔径的凝胶里当然跑不开。
  4、浓缩胶的长度或配比不对，样品没有很好的浓缩。

• 水母 (2014-7-07 16:26:32)

  求助：作了好几次免疫印迹，只跑出了marker,不知什么原因。蛋白的浓度因该在1mg/ml左右，胶的配置也应该没有问题。郁闷。

• gogo (2014-7-07 16:26:53)

  
  大家做tricine-sds-page 时，各层胶凝聚都需要多长时间？

• kuohao17 (2014-7-07 16:27:29)

  
  我们通常都是把10%sds放在37度恒温孵箱里，这样可以用好长时间

• vivian4123 (2014-7-07 16:27:57)

  分离胶半小时左右，浓缩胶十分钟，天气冷了可能稍有延长，可以适当多加temed,建议胶表面凝了也多放一会再用