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【求助】PCR产物怎么用乙醇沉淀法纯化?
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发表于: 2015-1-07 10:42 作者: PCR 来源: 分析测试百科网
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【求助】PCR产物怎么用乙醇沉淀法纯化?
我想用乙醇沉淀法纯化pcr产物,求助份具体步骤?谢谢
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【求助】PCR产物怎么用乙醇沉淀法纯化?
我也来说两句
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最新回复
fangxiang
(2015-1-07 10:43:07)
1.PCR产物中1:1加酚仿(苯酚:氯仿=1:1)抽提,12000g离心10分钟后取上清,后加入2倍无水乙醇沉降,20分钟后12000g离心10分钟,去掉溶液,将得到的白色沉淀干燥,加ddH2O回溶即可,但若是PCR产物较少,不建议此种方法。
最好能买个纯化试剂盒,也没多少钱
birdfish
(2015-1-07 10:43:26)
不喜欢用苯酚和氯仿,用的另一种方案:
加1/10的3N醋酸钠,再加3倍量无水乙醇,冰浴30min,13600rpm离心20min,弃上清.加75%乙醇,再离心20min,弃上清,真空干燥,加水溶解。
BUK
(2015-1-07 10:43:44)
离心时间越长回收率越高,尤其是小片段。
ending
(2015-1-07 10:44:04)
这种方法好用吗,与跑胶再胶回收的方法相比有什么优点
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【求助】PCR产物怎么用乙醇沉淀法纯化?
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fangxiang (2015-1-07 10:43:07)
最好能买个纯化试剂盒,也没多少钱
birdfish (2015-1-07 10:43:26)
加1/10的3N醋酸钠,再加3倍量无水乙醇,冰浴30min,13600rpm离心20min,弃上清.加75%乙醇,再离心20min,弃上清,真空干燥,加水溶解。
BUK (2015-1-07 10:43:44)
ending (2015-1-07 10:44:04)
这种方法好用吗,与跑胶再胶回收的方法相比有什么优点
【求助】PCR产物怎么用乙醇沉淀法纯化?