【求助】PCR产物怎么用乙醇沉淀法纯化?

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我想用乙醇沉淀法纯化pcr产物,求助份具体步骤?谢谢
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最新回复

  • fangxiang (2015-1-07 10:43:07)

    1.PCR产物中1:1加酚仿(苯酚:氯仿=1:1)抽提,12000g离心10分钟后取上清,后加入2倍无水乙醇沉降,20分钟后12000g离心10分钟,去掉溶液,将得到的白色沉淀干燥,加ddH2O回溶即可,但若是PCR产物较少,不建议此种方法。
    最好能买个纯化试剂盒,也没多少钱
  • birdfish (2015-1-07 10:43:26)

    不喜欢用苯酚和氯仿,用的另一种方案:
    加1/10的3N醋酸钠,再加3倍量无水乙醇,冰浴30min,13600rpm离心20min,弃上清.加75%乙醇,再离心20min,弃上清,真空干燥,加水溶解。
  • BUK (2015-1-07 10:43:44)

    离心时间越长回收率越高,尤其是小片段。
  • ending (2015-1-07 10:44:04)


    这种方法好用吗,与跑胶再胶回收的方法相比有什么优点
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