【求助】相同模板、引物、条件，隔一个月后PCR就...

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• douding66 (2015-1-13 15:56:01)

  貌似DNA降解了。DNA溶解液里加RNase I试试

• rfv (2015-1-13 16:00:49)

  点一下DNA检测一下。如果DNA没事，那就注意下扩增仪是不是同一台，有时候孔温略有不同会影响扩增。

• fox_79 (2015-1-13 16:01:10)

  真的有降解，好奇怪啊，在冰箱里放着也很少冻融的，怎么会降解呢？

• fox_79 (2015-1-13 16:03:42)

  QUOTE:

  原帖由 rfv 于 2015-1-13 16:00 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  点一下DNA检测一下。如果DNA没事，那就注意下扩增仪是不是同一台，有时候孔温略有不同会影响扩增。

  真的有降解，好奇怪啊，在冰箱里放着也很少冻融的，怎么会降解呢？

• ladyhuahua (2015-1-13 16:04:11)

  QUOTE:

  原帖由 fox_79 于 2015-1-13 16:03 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  真的有降解，好奇怪啊，在冰箱里放着也很少冻融的，怎么会降解呢？

  DNA提取好之后，为什么要测260/280的原因就在这了，提取的DNA中的蛋白质可能有DNA酶活性，DNA即使保存在-20也会被降解。另外260/230也要注意，盐残留对后续芯片质谱有影响。

• fox_79 (2015-1-13 16:06:20)

  QUOTE:

  原帖由 ladyhuahua 于 2015-1-13 16:04 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  DNA提取好之后，为什么要测260/280的原因就在这了，提取的DNA中的蛋白质可能有DNA酶活性，DNA即使保存在-20也会被降解。另外260/230也要注意，盐残留对后续芯片质谱有影响。 ...

  哇。这样啊，以前都不知道，谢谢哦。

• redbutterfly (2015-1-13 16:06:48)

  真的有降解，好奇怪啊，在冰箱里放着也很少冻融的，怎么会降解呢？
  
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  提取DNA的时候要在洗脱液里加RNase I。原因是：残留的RNA有些核酸酶会降解DNA。我们实验室的使用方法是将RNase I 100℃煮一下加到洗脱液里，也可以加到CTAB里。祝实验顺利！