【求助】提取RNA电泳条带分析

最新回复

• rxcc33 (2015-1-13 17:48:12)

  从图上看RNA有一定的降解，所以导致泳道涂抹的现象。

• yueban-1147 (2015-1-13 17:48:34)

  最后一个不是很好，但是这些做反转录是没问题的

• fangxiang (2015-1-13 17:49:05)

  能具体点吗???我对电泳条带不是很了解 也希望能学习学习

• glass (2015-1-13 17:49:25)

  很有可能是电泳过程中RNA降解了，需要用专门的RNA电泳仪跑RNA

• birdfish (2015-1-13 17:49:46)

  
  同意楼上的朋友的看法，RNA有一点降解，后两个泳道貌似降解的较严重，有些不清晰。
  

• 3N4G (2015-1-13 17:50:03)

  
  这就是RNA所谓的三条带吗？多大浓度的胶跑得？

• seagate (2015-1-13 17:50:25)

  将就用，还是可以反转录

• tianmei001 (2015-1-13 17:50:42)

  
  反转录的要求不高，可以用，不过最好还是注意提取过程中所用试管枪头等耗材用DEPC水处理好了，5S亚基条带较亮，降解挺严重的。另外胶也得用DEOC水稀释的电泳缓冲液来配置，梳子也要处理后再用，电压80V，不要太大。胶浓度1%就可以。

• youreyes (2015-1-13 17:51:40)

  
  很明显RNA被降解了，不过也可以做反转录的，只要能p出目的片段就可以了，楼主可以试试

• baidukk (2015-1-13 17:52:04)

  
  没有明显的DNA污染，也没蛋白多糖杂质什么的。
  提取的还算完整，最上面的两条分别是28s和18s，跑变性胶电泳的话亮度比应该是2:1，不过你的跑的是非变性胶，这个亮度比也可以了，最下面的是5s带，18s与5s带之间有拖带，说明有些微降解，不过影响应该不大，做后续的反转录应该是没问题的

• junhun (2015-1-13 17:52:31)

  额，我们实验室提完RNA直接反转录，从不跑RNA电泳。

• guagua (2015-1-13 17:52:59)

  反转录的要求不高，可以用，不过最好还是注意提取过程中所用试管枪头等耗材用DEPC水处理好了，5S亚基条带较 ...
  
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  电压小，跑的时间长不是会降解吗

• 2541 (2015-1-13 17:53:20)

  
  请问你用的什么方法提的RNA啊？我每次提的都降解的很厉害

• guagua (2015-1-13 17:53:43)

  QUOTE:

  原帖由 2541 于 2015-1-13 17:53 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  请问你用的什么方法提的RNA啊？我每次提的都降解的很厉害

  trizol法

• feima+ (2015-1-13 17:54:06)

  有些降解 理论上  第一条：第二条的亮度基本2:1尚可
  我想问一下，你的RNA是提了多久再跑电泳的啊？加样量是多大啊？如果不是马上跑电泳的，那是在什么条件下保存了多久呢？

• guagua (2015-1-13 17:54:44)

  有些降解 理论上  第一条：第二条的亮度基本2:1尚可
  我想问一下，你的RNA是提了多久再跑电泳的啊？加样量是 ...
  
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  提取完4度溶解一小时后测浓度然后跑电泳，加样量是3微升

• jujuba (2015-1-13 17:55:08)

  
  请帮忙分析一下下图是否有RNA的讲解，另外能否接着做反转录，请各位前辈指点。。。