【求助】凝胶电泳后EB染色紫外下无条带是怎么回事？

最新回复

• utt0989 (2015-1-14 16:42:20)

  胶漏了

• vvmmoy (2015-1-14 16:42:37)

  最右边是marker吗 还能看出条带，可能是你的DNA样品量不够，加了EB显影也不明显，当然，还有一种可能就是你的样品根本就不含目的条带

• youreyes (2015-1-14 16:42:53)

  
  有拖尾，如果是P的产物，那么你引物特异性不佳或许是这次试验不成功，重复一遍还是这个德行，那么，用降落P一遍看看，还是没有，要么重提DNA，要么就换引物吧……如果是DNA样品，干脆扔掉算了……质量太次了

• sunnyB (2015-1-14 16:43:18)

  
  我是学临床的，现在做PCR的实验，还是新手，希望各位高手多多指教。
  最右面第一孔是Marker，依次向左，孔2-5是酶切产物，孔6-9是PCR产物。之前做的几次还得到PCR产物了，就是不是目的条带，这次按新的条件竟然跑胶时什么都没有。
  

• mingming0638 (2015-1-14 16:43:33)

  
  目的条带没有或者不清晰，很大的可能是P后就没有条带，与胶的关系不是很明显；Marker还是能看得清的

• wood533 (2015-1-14 16:43:51)

  
  是不是胶浓度不对~~

• kuohao17 (2015-1-14 16:44:17)

  
  看似是加样没有加好，上样时样品是不是从孔中漂出来了很多，还有就是加样之前要查看下加样孔中是不是有气泡
  

• zzzz (2015-1-14 16:44:45)

  还有就是mark最好放在胶的中间

• daod (2015-1-14 16:44:59)

  电泳液时间是否放长了

• vvmmoy (2015-1-14 16:45:26)

  我是学临床的，现在做PCR的实验，还是新手，希望各位高手多多指教。
  最右面第一孔是Marker，依次向左，孔2 ...
  
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  你酶切的 质粒对照 跑电泳怎么样？或者样加少了

• sunnyB (2015-1-14 16:45:48)

  谢谢大家的帮忙，我加样时确实有部分样品从孔里飘出来了，也有可能是胶漏了，我再重复一次看结果怎样

• ending (2015-1-14 16:46:12)

  
  配胶时就加EB吧

• abc816 (2015-1-14 16:46:35)

  我是学临床的，现在做PCR的实验，还是新手，希望各位高手多多指教。
  最右面第一孔是Marker，依次向左，孔2 ...
  
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  marker能看到，说明不是胶的问题。pcr的无条带，个人觉得就是没有p出来，不是胶的问题。你可以将你的退火温度多做几个个梯度，根据你的目的片段的大小，设置好退火的时间，及复性的时间，再看看结果吧。

• zwsyrt (2015-1-14 16:46:50)

  
  胶没配好

• birdfish (2015-1-14 16:47:07)

  
  是不是胶配的时间太长了？

• koook5695 (2015-1-14 16:47:24)

  
  可能的原因比较多的，比如你的引物设计长度、特异性决定能不能在退火结合上去，模板的质量高低，还有你的操作是否有问题等等

• hold住 (2015-1-14 16:47:41)

  EB重新配试试

• wiwi (2015-1-14 16:48:00)

  
  电压是不是也有问题，Marker条带跑的有点歪，加样手法貌似也有问题

• baidukk (2015-1-14 16:48:23)

  
  建议重新配胶，换电泳液再跑一次看结果，若marker清晰可见，条带分明则考虑PCR是否P出来没

• yueban-1147 (2015-1-14 16:48:38)

  
  样品有问题 可能没扩出来 marker上样多少 也不清楚