【求助】怎么区分污染和引物二聚体

最新回复

• xue258 (2015-2-13 09:44:42)

  你指的污染是gDNA污染么，如果是这个污染，应该也扩出目的基因的。
  你目的片段多大，引物二聚体的大小应该不会直逼目的片段长度吧。
  溶解曲线有两个峰，首先考虑是否是引物特异性不好。

• 喇叭花 (2015-2-13 09:45:03)

  
  应该是引物不行

• flyxx05 (2015-2-13 09:45:33)

  
  换引物试试吧

• 米囡 (2015-2-13 09:45:54)

  QUOTE:

  原帖由 flyxx05 于 2015-2-13 09:45 发表 bbcodeurl('http://bbs.antpedia.com/images/common/back.gif', '')
  
  换引物试试吧

  之前有人用这对引物做过，效果还行，并无二聚体和非特异扩增，我也做了下普通PCR，只有二聚体，没有目的条带，哎，难道是我的条件摸的不对吗？

• 冰儿0109 (2015-2-13 09:46:19)

  我之前做也出现过这种情况  师兄建议我换引物  慢慢摸索吧  

• one (2015-2-13 09:46:41)

  
  我也正准备做这部分内容，看了很多相关资料，出现单峰曲线说明引物特异性较好，建议你再重新设计引物，摸下条件，然后再做！

• fklo83 (2015-2-13 09:47:12)

  
  或许是因为印务特异性不够，你试着提高退火温度

• 49888 (2015-2-13 09:47:32)

  
  重复试验不一定会成功，还是引物多试下吧

• sunnyB (2015-2-13 09:47:57)

  试下梯度，温度梯度包括模板和引物的浓度梯度，优化一下条件看看