【求助】荧光定量PCR的结果讨论

最新回复

• JK.jon (2015-4-28 15:13:40)

  
  挺好的，没有非特异性扩增

• abc816 (2015-4-28 15:15:11)

  这个荧光定量的溶解曲线说明特异性很好。文献一般不用把这个图当做Fig贴上。
  验证作用，只是荧光定量结果的一部分。

• zzzz (2015-4-28 15:16:40)

  这是融解曲线，只是验证有没有非特异性扩增，如果你要看用药和没有用药目标基因的表达量，得看CT值 ，

• yizhi (2015-4-28 15:16:57)

  跑的挺好

• vvmmoy (2015-4-28 15:26:18)

  
  没有二聚体和非特异性扩增，非常典型的图

• am10 (2015-4-28 15:27:29)

  
  这只是一个溶解曲线。结果还不错。
  但是分析数据，不是靠这个。如楼上所说，CT值。

• any333 (2015-4-28 15:30:05)

  
  你用的应该是荧光染料，他对模板没有选择性，所以特异性不如Taqman探针法。熔解曲线就是弥补这一特性的实验。你的图说明PCR反应的特异性不错，也就是你的引物设计、纯度和PCR设置程序没问题。
  希望能帮到你！

• bring (2015-4-28 15:31:56)

  
  楼主要把各个CT值跟内参比照做相对定量

• zhy平平 (2015-4-28 15:32:30)

  
  没有二聚体和非特异性扩增，这只是熔解曲线看来还可以主要是看CT值得

• dior (2015-4-28 15:34:11)

  
  引物设计的太好了嘛，比我的强多了

• remonte (2015-4-28 15:34:30)

  
  没有非特异性扩增 很好啊

• feiya (2015-4-28 15:34:54)

  
  你这个只是个溶解曲线啊，是很好啊，木有扩增曲线

• yizhi (2015-4-28 15:37:14)

  
  你这个溶解曲线图很正常，而且没有明显的二聚体和非特异性，你得根据CT值来计算得出的数值，从这个图中是没法进行定量分析的！选择一个合适的计算方法，再分析与内参基因的比较数值！
  

• dog002 (2015-4-28 15:38:02)

  楼主要把各个CT值跟内参比照做相对定量
  
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  请问，是靶基因跟相应组内参基因比较吗？如果各组中内参基因表达差异较大，该怎么办？还是同一组内靶基因和内参基因比较吗？感谢赐教

• veiwu (2015-4-28 15:41:41)

  不用这个图，一般用柱状图或者文字表述，国内文献可能需要这个图，另外计算的时候用excel里面的power参数。希望对你有用。

• yizhi (2015-4-28 15:48:22)

  请问，是靶基因跟相应组内参基因比较吗？如果各组中内参基因表达差异较大，该怎么办？还是同一组内靶基因 ...
  
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  把靶基因和相应组内藏基因比较，再比较各个组。一般来说内参表达差异不大，同一种属的内参理论上也不应该有比较大的差异吧。