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【求助】怎么延长保留时间，使峰分开？
【求助】怎么延长保留时间，使峰分开？
所有峰都在12分钟左右出来了，我要的峰在7.3min左右，但7.1min左右有一个峰和我要的峰重叠了，我想把峰的保留时间拉长！
流动相甲醇-水=25:75， 要延长保留时间，是不是要降低甲醇的比例呀？还有其他方法吗？
还有我感觉提取物中的成分应该很复杂，但药典上给的流动相又是甲醇-水=25:75，等度洗脱，甲醇的比例这么低，不是很多成分冲不出柱子，我需要每进完一针，用高浓度的甲醇冲洗柱子，再平衡；还是不用管残留在柱子的东西，每次基线平了，就进下一针？（这样会不会柱效越来越低）
请高手解答，万分感谢！
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最新回复
JK.jon (2015-6-23 16:54:15)
langlang (2015-6-23 16:54:37)
veiwu (2015-6-23 16:59:39)
finger (2015-6-23 16:59:55)
为什么我的回复都要什么审核呢
zhezhe (2015-6-23 17:00:36)
如果是上一针的残留：还有你可能冲的时间不够，有残留成分，多冲一段时间看看后面有没有峰
dior (2015-6-23 17:00:58)
我把甲醇-水从25:75改成20:80，峰分得很开！
不过我还是不太明白，中药提取物的成分这么复杂，甲醇比例这么低，多冲下，也能把杂质冲出来吗？等梯度甲醇这样跑，基线平了就可以进样吗？
会不会有些成分，用比例低的甲醇冲很久都不会出峰，还吸附在柱子上，一定要用比例高的甲醇来洗脱？
这个小疑问，希望大家解答下，谢谢
ns5fan (2015-6-23 17:02:11)
xue258 (2015-6-23 17:02:40)
如果是上一针的残留：还有你可能冲的时间不够，有残留成分，多冲一段时间看看后面有没有峰
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药典方法是可以做调整的，包括EP，USP等。但是调整不能太大，一般都有一个百分比限制。
xue258 (2015-6-23 17:03:16)
我把甲醇-水从25:75改成20:80，峰分得很开！
不过我还是不太明白，中药提取物的成分这么复杂，甲醇比例这么低，多冲下，也能把杂质冲出来吗？等梯度甲醇这样跑，基线平了就可以进样吗？
会不会有些成分，用比例低的甲醇冲很久都不会出峰，还吸附在柱子上，一定要用比例高的甲醇来洗脱？
这个小疑问，希望大家解答下，谢谢
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中药一般比较毁柱子，关键就因为它成分太多，很多脏东西比较容易吸附在柱填料上洗不下来，所以一般建议每次做完之后，适当转换成全有机相（或者梯度）多洗一会柱子。或者直接一点的办法：配保护柱。
is2011 (2015-6-23 17:03:52)
langlang (2015-6-23 17:04:34)
【求助】怎么延长保留时间，使峰分开？