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【求助】如何调整流动相梯度使氨基酸混标很好地分离?
相关检测项目:【求助】如何调整流动相梯度使氨基酸混标很好地分离?
氨基酸
在下现在在优化液相条件,用流动相为A:10mM甲酸铵水溶液,加0.1%甲酸;B:甲醇:水(95:5),加2mM甲酸铵和0.1%甲酸,测10种氨基酸的混标,试了很多种梯度都不能把样品很好地分开,而且峰形也很差,如图所示是其中一个梯度,实验室师姐之前用过的,我现在做也不行。求大神解答调整流动相梯度有没有什么规律可循,感激不尽!
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最新回复
丁香@@ (2015-9-22 16:36:51)
紫烟 (2015-9-22 16:38:14)
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taoshengyijiu (2015-9-22 16:38:37)
紫烟 (2015-9-22 16:39:08)
QUOTE:
我们的机器是二手的,都不知道有没有这些,一般是附在说明书里的吧?回头找找,谢谢了DDD (2015-9-22 16:39:40)
QUOTE:
= =!不知道楼主是什么仪器!这个不在说明书里!
找有分析包的厂家要文献吧
一直都用这分析包来做氨基酸,效果挺不错,就是耗材贵了点
紫烟 (2015-9-22 16:40:15)
QUOTE:
好吧见笑了,我们的仪器是waters最古老的那种,没听说有分析包呢DDD (2015-9-22 16:40:50)
QUOTE:
waters有氨基酸的分析包!找他们销售要,之前想用waters的分析包,但是联系他们很久都不搭理,直接用第二个厂家的
idea2011 (2015-9-22 16:41:28)
biabiade (2015-9-22 16:42:07)
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楼主 针对氨基酸组分的检测:
①分离度一般用洗脱程序调节难度系数过大,但其分离度一般同流动相酸度、
柱温箱温度关系较大;
②目前,氨基酸组分的检测主要采用的是HPLC柱前衍生法检测,效果不错,
可同时检测多种(可达20多种)组分;
③看楼主给出的图谱,貌似使用液质检测吧,若使用液质,不衍生可直接检
测氨基酸组分,即可定量、定性,其实不用太在乎分离度,关键是总离子
谱图在选择离子谱图提取时,提取出的谱图能够分析,便于定量、定性即可。
紫烟 (2015-9-22 16:42:48)
QUOTE:
我的确是使用的液质检测,原来可以不在乎分离度吗?我是打算先用标样把条件都优化好,后面就用这个条件去从实际样品中检测这些组分,这样如果保留时间都重叠在一起不会有影响吗?lorri (2015-9-22 16:43:18)
QUOTE:
液质检测可以不在乎分离度。关键在于:从总离子谱图中提取选择离子谱图时,能够提取到你需要的谱图即可。因为质谱的定性主要依靠离子碎片,即一个定量离子、一个或多个定性离子。
xue258 (2015-9-22 16:43:55)
【求助】如何调整流动相梯度使氨基酸混标很好地分离?