【求助】不同浓度的同一样品保留时间不一致

请问各位高手:
       我现在碰到一个奇怪的问题,最近买了supelcosil LC-SCX的柱子5um,25cm×4.6mm做中国药典2010版的盐酸二甲双胍片有关物质检查,流动相1.7%的磷酸二氢铵溶液。其中盐酸二甲双胍峰的保留时间不一致:10mg/ml的样品溶液保留时间为16分钟,50ug/ml的自身对照溶液保留时间为22分钟。不知道是什么原因造成的?

我也来说两句 查看全部回复

最新回复

  • 简森si (2015-9-23 11:04:57)

    流动相稳定不?
  • 丸子妹 (2015-9-23 11:05:31)

    看看色谱图如何?

    不同浓度的保留时间会有所不同的。
  • 丸子妹 (2015-9-23 11:06:20)

    一般来说 浓度差别这么多 保留时间不一致正常 但也仅差1~2min 楼主差别这么多 很少见哦
  • qiangren789 (2015-9-23 11:06:35)

    以前做过,浓度不一样出峰时间有时候会相差很大。特别是在柱子拖尾的情况下
  • TNT (2015-9-23 11:06:51)

    同一个物质保留时间理论上是必须相同的。
    但理论的情况是相同条件,包括相同流动相比例,相同柱压,相同延迟体积和死体积等。
    我遇到过两次保留时间不同的情况
    一次是发现柱子前端没有接好,死体积大了。
    还一次是排液阀没拧紧,这是通过看系统的压力发现的。
    不知道你这种情况的重现性好不好啊?
    可以隔几天后再做一次。
  • TNT (2015-9-23 11:07:29)

    还有一点就是样品的PH值也会影响保留时间,如果不同浓度的样品PH值差很多,那也是一种原因。可能来自样品的原因有很多,不过可以通过重现性的好坏来判断。
  • 小米虫子 (2015-9-23 11:07:49)

    最好检查下你的仪器是否稳定,比如压力,流速,流动相比例等等,保留时间不一致也很正常,不过查这么多就很离谱了,我怀疑你的系统不稳定
  • seagate (2015-9-23 11:08:04)

    差一点点可以理解,差这么多就有问题了,,多走几针看看,是不是每针都是这种情况。。。。
  • xuuuu (2015-9-23 11:08:25)

    就是每针都这样,而且同一浓度的出峰时间不变。10倍浓度,百倍浓度的就保留时间不一致。
  • loli (2015-9-23 11:08:43)

    把柱子冲洗一下,再多注几个样
  • misswu61 (2015-9-23 11:09:03)

    最好看看色谱图。
    如果峰不对称,保留时间随峰高变化比较明显。
  • 牛顿 (2015-9-23 11:09:24)

    有可能是使用的色谱柱不合适吧?如果重现性好就不是仪器的问题
    而是方法的问题。
  • woshi (2015-9-23 11:09:39)

    个人觉得与样品浓度差异太大,引起体系平衡状态不一样有关系,样品是盐酸盐,缓冲液是碱,务必会形成一定的平衡稳定状态,浓度的影响将会改变这种平衡状态差异而造成,保留时间不一致。当然这是保证外部条件一致的条件下,做以上推断。
  • @木木@ (2015-9-23 11:10:00)


    两张图对比一下,是不是大浓度的峰程时间比较长。